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 Ibridazione in situ su tessuto per mRNA
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Dex
Nuovo Arrivato

Spiral
Città: Milano


12 Messaggi

Inserito il - 30 ottobre 2010 : 15:31:38  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Dex Invia a Dex un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti!
Vorrei fare degli esperimenti di ibridazione in situ su tessuto (ISHH) per identificare quali cellule esprimono un mRNA di mio interesse. Ho trovato alcune linee guida per il disegno della sonda in un vostro protocollo,
http://www.molecularlab.it/protocolli/protocol.asp?id=36

ma non mi sono chiare alcune cose:

1) c'è scritto di disegnare la sonda nella CDS o nelle sue vicinanze. Ma se voglio ibridare solo RNA, non devo disegnarla a cavallo di due esoni per evitare il DNA? Se scelgo un solo esone esiste un pretrattamento per impedire l'ibridazione con DNA genomico?

2) Posso scegliere anche esoni fuori dalla CDS?

3) Vorrei individuare due diverse forme di splicing per il mio gene. Si può usare l'ibridazione in situ o è sconsigliata?

Grazie
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