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GFPina
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Cittā: Milano
8408 Messaggi |
 Inserito il - 02 novembre 2006 : 19:02:52
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Io tempo fa ho usato questo protocollo da 10ml di coltura:
Dopo aver pellettato le cellule aggiungi 25ml di 10 mM Tris-Cl pH 7.5, aggiungi il protease inhibitor porti a volume di 45ml con PBS o ancora con 10 mM Tris-Cl pH 7.5.
Aggiungi 1/10 di volume di Lysozyme (10mg/ml) e agiti per 30 min a 30°C-37°C in bagnetto
Congeli in azoto liquido o nel freezer e poi scongeli di nuovo a 37°C per 15 min.
Per eliminare il DNA aggiungi 1/10 di volume DNase (1mg/ml) e 10x DNase Buffer e agiti per 15-30min
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