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Lck3
Nuovo Arrivato
30 Messaggi |
 Inserito il - 14 giugno 2012 : 17:05:30
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ciao a tutti,
domanda semplice indolore... e spero 
sto' facendo il gel per l'sds...
la ricetta mi chiede 4-10%.
So' che questa e' la % acrylamide... ma non capisco una cosa.
Il 4-10 % di cosa?
perche' se vado a vedere non e' il 4 % della soluzione che preparo...
acrylamide e' al 30%... 
grazie per l'aiuto!
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 14 giugno 2012 : 17:30:02
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Non è molto chiaro, cosa dice "esattamente" la ricetta? A che % devi farlo?
4-10% scritto così in genere è un gel a gradiente, ma non puoi farlo a mano, dovresti avere un gradientatore!
L'altra possibilità che mi viene in mente è che siano le percentuali di acrilamide dello stacking (4%) e del resolving (10%). In genere quando si preparano gel a mano, la percentuale del resolving varia a secondo delle proteine che voglio visualizzare, mentre quella dello stacking è al 4%. Quindi nel tuo caso mi sembra la cosa più probabile, ma senza sapere cosa c'è scritto esattamente nella tua ricetta diventa un po' difficle interpretare! |
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Lck3
Nuovo Arrivato
30 Messaggi |
Inserito il - 14 giugno 2012 : 17:53:55
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scusami sono stata poco chiara.
quando dico 4-10% mi riferisco
4% allo stacking e 12% al resolving gel.
La mia domanda e' di tipo teorico.
4% ( o 12%) e' la percentuale dell'acrillamide.
ma e' il 4% di cosa?
spero di essere stata piu chiara...
cmq grazie  |
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 14 giugno 2012 : 18:08:24
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Ma parti da uno stock, vero?
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So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 14 giugno 2012 : 18:21:24
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È la percentuale finale di acrilammide che avrai nel gel.
Quindi ad es. poniamo che devi fare un resolving al 10% e ne preprari 15ml, prenderai 5ml della tua acrilammide al 30%.
È una semplice diluizione!
Il tuo gel da 10% è passato al 12% alla riga sucessiva io ti ho fatto un esempio per quello al 10% ma con qualunque percentuale il ragionamento è lo stesso, basta fare i conti.
Nel caso non sapessi bene come fare i conti per concentrazioni e diluizini ti consiglio la lettura di questi link: http://www.molecularlab.it/principi/calcoli-laboratorio/
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Lck3
Nuovo Arrivato
30 Messaggi |
 Inserito il - 14 giugno 2012 : 18:29:38
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e' vero !!! grazie mille!!!
ma io e le diluizioni non andiamo d'accordo!!!
Grazie ancora!!!! |
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
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% acrylamide 
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