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Autore

Discussione

laboratorista26284
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 08 settembre 2013 : 14:29:32

Scritto da MolecularLab Mobile

Ciao ragazzi!
In lab devo preparare una mix di dNTPs con concentrazione finale complessiva di 2mM. Ogni nucleotide ha una concentrazione di 100 mM. Considerando che il volume finale della mix di dNTPs è di 500 ul, mi dite per favore il volume di acqua e di singoli nucleotidi che devo mettere.
Grazie

chick80
Moderatore

Città: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 08 settembre 2013 : 17:34:14

Beh, se devi passare da 100mM a 2mM quanto devi diluire?

Lettura consigliata
http://www.molecularlab.it/principi/calcoli-laboratorio/

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laboratorista26284
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 12 settembre 2013 : 09:32:07

Quindi considerando che la Cf di tutti equattro i nucleotidi deve essere 2mM, ognuno avrà un Cf di 0.5mM.
Per cui Ci=100mM, Cf=0.5mM e Vf=500 ul.
Pertanto il Vi di ogni nucleotide sarà pari a 2.5 ul.
Quindi avrò 490 ul di acqua e i rimanenti 10ul di nucleotidi.
É corretto il mio ragionamento ?
Grazia chick80!

GFPina
Moderatore

Città: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 12 settembre 2013 : 17:53:49

Citazione:
Messaggio inserito da laboratorista26284

Ciao ragazzi!
In lab devo preparare una mix di dNTPs con concentrazione finale complessiva di 2mM. ...

Sei sicura che sia la concentrazione "complessiva"? In genere nelle mix di nucleotidi si indicano le concentrazioni per "singolo" nucleotide, dovresti prepararla in modo da avere 2mM di ciascuno!

Se fosse "complessiva" e quindi 0.5mM di ognuno i tuoi conti sarebbero giusti, ma controlla perché mi sembra strano!