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moonlight90
Nuovo Arrivato



1 Messaggi

Inserito il - 03 marzo 2015 : 08:53:59  Mostra Profilo Invia a moonlight90 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Scritto da MolecularLab Mobile

Buon giorno a tutti, da poco mi sto cimentando in clonaggi....ho un frammento di DNA amplificato con primer contenenti giā siti di restrizione ora il mio dubbio č: una volta purificata la pcr da agarosio devo ridigerire la pcr prima di inserirla nel plasmide???????

Lannister
Nuovo Arrivato



5 Messaggi

Inserito il - 03 marzo 2015 : 23:12:19  Mostra Profilo Invia a Lannister un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Si, perché la polimerasi ha amplificato tutto il frammento, su entrambi i filamenti, e ti ha dato una molecola ad estremitā piatte... adesso il dna va digerito per ottenere le estremitā sticky che ti permetteranno di inserirlo nel plasmide
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Utente Junior



565 Messaggi

Inserito il - 04 marzo 2015 : 18:18:42  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di lā Invia a lā un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
E il plasmide deve essere digerito con gli stessi enzimi di restrizione.
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Geeko
Utente

Ctenophor1.0

Cittā: Milano


1042 Messaggi

Inserito il - 04 marzo 2015 : 22:23:39  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Geeko Invia a Geeko un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Se invece usi il sistema TA/TOPO cloning non ne avresti bisogno!


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