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Tag   Northern    Trasferimento    RNA  Aggiungi Tag

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Tiz.S.
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Inserito il - 03 novembre 2016 : 11:27:21  Mostra Profilo Invia a Tiz.S. un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti,
sto provando da settimane ormai ad eseguire un northern Blot (Dig Northern Starter Kit della Roche). Per il trasferimento sto seguendo quanto detto nel protocollo (trasferimento overnight in SSC 20x su membrana di nylon carica positivamente). Sto notando che però i pesi molecolari più alti (quelli oltre le 2,5Kb) la mattina seguente sono ancora all'interno del gel. Nonostante abbia provato ad utilizzare l'SSC 10x o delle membrane di nitrocellulosa il risultato è sempre lo stesso. Per il trasferimento metto in una vaschetta l'SSC, una lastra di vetro apposggiata sopra, un foglio di 3MM a "ponte", 3 fogli di 3MM bagnati in SSC, il gel con i pozzetti rivolti verso il basso, la membrana, 3 fogli di 3MM asciutti, una pila di carta da bancone ed un peso da circa 300g...
Qualcuno di voi ha qualche trucco/consiglio per facilitare il passaggio?
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