Forum

Nome Utente:
Password:
Riconoscimi automaticamente
 Tutti i Forum
 Laboratorio
 Biologia Molecolare
 Lisi alcalina per preparazione di DNA plasmidico AIUTO
 Nuova Discussione  Nuovo Sondaggio Nuovo Sondaggio
 Rispondi Aggiungi ai Preferiti Aggiungi ai Preferiti
Cerca nelle discussioni
I seguenti utenti stanno leggendo questo Forum Qui c'è:

Aggiungi Tag Aggiungi i tag

Quanto è utile/interessante questa discussione:

Autore Discussione  

Giulia52
Nuovo Arrivato



2 Messaggi

Inserito il - 07 febbraio 2017 : 13:59:52  Mostra Profilo Invia a Giulia52 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti, vorrei un vostro aiuto. Sto studiando la midipreparazione di DNA plasmidico, non mi è chiaro un punto:

Nella lisi alcalina dopo l'aggiunta della soluzione contenente SDS e idrossido di sodio (che determina la denaturazione delle proteine, solubilizzazione dei lipidi e quindi rottura della membrana, denaturazione degli acidi nucleici), si procede con l'aggiunta di una soluzione contenente Potassio acetato e acido acetico.
Quest'ultima determinerà :1)la rinaturazione del DNA perchè neutralizzerà il pH alcalino del precedente step, e 2) la precipitazione dell'SDS insieme alle proteine e ai detriti cellulari.

Ecco non mi è chiaro come il potassio acetato e l'acido acetico possano portare alla precipitazione dell proteine.
Potete aiutarmi per piacere?
Grazie

Geeko
Utente

Ctenophor1.0

Città: Milano


1043 Messaggi

Inserito il - 07 febbraio 2017 : 23:19:31  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Geeko Invia a Geeko un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
L'SDS o sodio-dodecilsolfato è solubile in acqua soprattutto a pH leggermente basico. Al contrario il potassio-dodecilsolfato (KDS) è insolubile in acqua (e il pH acido non fa altro che ridurne ulteriormente la solubilità, oltre a neutralizzare l'NaOH nella soluzione precedente). Quindi non appena aggiungi l'acetato di potassio i complessi SDS/proteine prima perfettamente solubili ora diventano complessi KDS/proteine, precipitando istantaneamente (come vedi bene anche guardando la provetta).


Torna all'inizio della Pagina
  Discussione  

Quanto è utile/interessante questa discussione:

 Nuova Discussione  Nuovo Sondaggio Nuovo Sondaggio
 Rispondi Aggiungi ai Preferiti Aggiungi ai Preferiti
Cerca nelle discussioni
Vai a:
MolecularLab.it © 2003-18 MolecularLab.it Torna all'inizio della Pagina