costruire sonde taqman per rna con primer express

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lamp
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13 Messaggi

Inserito il - 09 dicembre 2007 : 10:16:02

ciao ragazzi, tutto bene?? qualcuno mi può aiutare per la costruzione di primers e relativa sonda taqman. penso che il ragionamento sia lo stesso della costruzione di semplici primers riassumendo:
-considero le cds della mia sequenza di mRNA, la importo nel prog primer express
- utilizzo i parametri di defeault del programma e dò l'invio per cercare sonda e primers.
dopo faccio una verifica per harping e dimeri e anche un blast per vedere la specificità.
e poi?? per impostare i parametri di real time pcr con relativi concenrazioni di primers sonda e campioni??
vi ringrazio in anticipo e aspetto vostre delucidazioni