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Autore

Discussione

ameliap
Nuovo Arrivato

32 Messaggi

Inserito il - 29 maggio 2008 : 15:25:09

ciao a tutti,
dopo gli utili consigli della volta scorsa approfitto per chiedere ancora

Dovrei fare delle reazioni di pcr utilizzando i marcatori molecolari microsatelliti ma non so bene quanto DNA usare, devo usarne 30ng come uso di solito per le sequenze o ne basta anche molto meno?

ciao ciao e graaaazie è un sito fighissimo

darkene
Utente Junior

291 Messaggi

Inserito il - 29 maggio 2008 : 17:17:14

dipende da caso a caso. le pcr per microsatelliti danno frammenti molto piccoli, quindi incorporano poco etidio. io personalmente uso pi� dna rispetto ad una pcr normale, perch� delle volte non riesco a vedere alcune bande.
io faccio microsatelliti quali Apo-beta, 4f7 e altri e utilizzo 200-500 ng.

ameliap
Nuovo Arrivato

32 Messaggi

Inserito il - 29 maggio 2008 : 18:19:08

ciao Darkene,
grazie
io però non guardo le pcr su agarosio ma sul seq autonamtico che è molto più sensibile quindi è un pò diverso...

sonanta
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 07 aprile 2011 : 17:07:43

Ciao a tutti,
mi unisco alla vostra discussione per chiedere se qualcuno ha mai fatto una multiplex, se si � come una pcr normale o si apporta qualche correzione? Quanto DNA si usa, il doppio per la competizione dei due primers?
Grazieeeeeeeeeeeeeeeeeee!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!