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biociccia
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1 Messaggi

Inserito il - 25 ottobre 2009 : 15:36:10  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di biociccia Invia a biociccia un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
salve a tutti, dovrei allestire un sds-page con campioni di urine. potreste consigliarmi su come processare i campioni per separarne le proteine?

GFPina
Moderatore

GFPina

Cittā: Milano


8408 Messaggi

Inserito il - 25 ottobre 2009 : 16:11:55  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Beh dipende da cosa devi vedere.
Io analizzo urine di topi mediante SDS-PAGE (lavoraccio ) e semplicemente le centrifugo a 4°C per circa 15min a 2500rpm dopo la raccolta per eliminare possibili depositi, poi le trasferisco in una nuova provetta e ne prendo una aliquota a cui aggiungo Sample buffer (lo uso non riducente) e le carico direttamente su gel, ho anche eliminato lo step della denaturazione 5min a 95°C perchč non mi sembrava cambiasse niente, ma puoi comunque sempre farlo se preferisci.
Io utilizzo un gel al 10%.
Beh se hai bisogno di altre informazioni chiedi.

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