sequenziamento massivo e metodo sanger

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CpGislands
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3 Messaggi

Inserito il - 22 settembre 2010 : 12:01:08

Salve una domanda banale...
perch� tecniche di sequenziamento sono dette massive?
nel classico sequenziamento con metodo Sanger se si vuole usare il fosforo radioattivo devono essere marcati sia i dNTPs che il primer? e con la chemioluminescenza?

grazie

tittideby
Nuovo Arrivato

65 Messaggi

Inserito il - 23 settembre 2010 : 16:52:18

1)massivo deriva dal fatto che con quel tipo di tecnica riesci a sequenziare cluster di molecole...cio� ad ottenre un gran numero di molecole dello stesso tipo...addirittura fino a 60 milioni con il metodo 454 e ben 600 milioni con il metodo solexa.
2)nel metodo sanger quello che si marca � il ddNTP ovvero i terminatori della reazione.....credo non cambi a seconda del fatto che utilizzi la radioattivit� o la fluorescenza.Poich� il sanger viene effettuato tramite elettroforesi capillare....ad ogni ddNTP marcato che si lega corrisponde una luce emessa perch�,lo stesso (ddNTP) viene attraversato da un raggio laser.Quindi attraverso l'elettroforesi capillare otterai una serie di frammenti che si saranno separati in virt� del fatto che ognuno termina in corrispondenza di un ddNTP diverso.
Spero di essere stata chiara e di aver chiarito i tuoi dubbi.....ciaooooooooooo