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 Biologia Molecolare
 stabilire le dimensione del genoma di un lievito
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amicia
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24 Messaggi

Inserito il - 08 giugno 2012 : 10:46:36  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di amicia Invia a amicia un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve, qualcuno puo indicarmi alcune metodologie, ad eccezione del sequenziamento, per avere un'idea circa le dimensioni del genoma di un organismo come un'alga o un lievito?
Grazie per le risposte

0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 08 giugno 2012 : 13:23:37  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Forse un'elettroforesi in campo pulsato applicata sui singoli cromosomi prima separati tra loro?
Ma non ne sono per niente sicuro, aspettiamo gli altri.

So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

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SpemannOrganizer
Utente

Spemann

Città: Los Angeles


955 Messaggi

Inserito il - 08 giugno 2012 : 15:56:31  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di SpemannOrganizer Invia a SpemannOrganizer un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
uhmmmm ma come li separi i cromosomi l'uno dall'altro?

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SpemannOrganizer
Utente

Spemann

Città: Los Angeles


955 Messaggi

Inserito il - 08 giugno 2012 : 16:38:06  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di SpemannOrganizer Invia a SpemannOrganizer un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Leggo su internet che, escludendo il sequenziamento, si può misurare la dimensione di un genoma con la citofluorimetria o densitometria di nuclei colorati con Feulgen. Cercavo qualcosa di + specifico anche sul gene IX, ma stranamente non ho trovato nulla a riguardo. Controllo con + calma + tardi....

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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 08 giugno 2012 : 16:44:26  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Avevo letto che si potevano separare tra loro i cromosomi, ma sinceramente non mi ricordo proprio come.

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A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

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roberta.s
Utente Junior

yeast

Città: Parigi


564 Messaggi

Inserito il - 08 giugno 2012 : 17:11:14  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di roberta.s Invia a roberta.s un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Dunque dunque... si puo' fare una Pulsed Field Gel Electrophoresis (elettroforesi sul gel in campo pulsato) che permette di separare, tramite elettroforesi su gel d'agarosio, appunto, ed utilizzando specifici parametri di migrazione, frammenti di DNA di diversa lunghezza, in questo caso i cromosomi. dopo la corsa, si visualizzando le bande su gel, se ne determina il peso molecolare e si puo', infine, dedurre la lunghezza totale del genoma.

Di certo questa tecnica non è precisissima, ma ti permetterà di visualizzare tutti i cromosomi. Attenzione pero' ai parametri che usi, perché se due cromosomi hanno simile lunghezza sarà difficile vedere due bande distinte.
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SpemannOrganizer
Utente

Spemann

Città: Los Angeles


955 Messaggi

Inserito il - 08 giugno 2012 : 17:17:36  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di SpemannOrganizer Invia a SpemannOrganizer un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ma so che la PFGE può essere applicata ad organismi complessi, che contengono più di un cromosoma? Rimane affidabile?

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roberta.s
Utente Junior

yeast

Città: Parigi


564 Messaggi

Inserito il - 08 giugno 2012 : 17:43:17  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di roberta.s Invia a roberta.s un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Abbastanza da vedere grossi riarrangiamenti (grosse delezioni/inserzioni o traslocazioni, ecc), ma ovviamente la risoluzione non è alta.
Bisognerebbe chiedere all'utente cosa cerca nello specifico
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