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peyton
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Inserito il - 09 giugno 2014 : 11:13:21  Mostra Profilo Invia a peyton un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao! ho dei problemi a questo esercizio: un ricercatore ha preparato una soluzione di BSA e l'ha quantificata allo spettrofotometro. La BSA ha un coefficiente di estinzione molare di 43824. La lettura spettrofotometrica della soluzione di BSA in una cuvette con cammino ottico di 0,2 cm è di 0,68.

1) Calcolare la concentrazione della soluzione di BSA
Questa parte l'ho già fatta:
A=5*0,2=3,4
C=3,4/43824=0,0000776 M

2) Che volume di questa soluzione è necessario per preparare 10 ml di una soluzione di BSA concentrata 1 ug/ul sapendo che il peso molecolare della BSA è pari a 66,4 kDa. E' possibile preparare una soluzione concentrata 10 ug/ul???

So che probabilmente è molto facile ma non capisco cosa farci con il peso molecolare e con le unità di misura diverse!!

Grazie per l'aiuto!

Neuroscience
Utente



659 Messaggi

Inserito il - 09 giugno 2014 : 14:52:39  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Neuroscience Invia a Neuroscience un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
non concordo su come tu abbia svolto il primo punto anche se il risultato è identico
dovresti usare la formula di Lambert & Bear
A=e c l
0,68=43824 c 0.2
c= 0,68/(0.2*43824) = Risultato identico (in moli)

il peso molecolare probabilmente ti serve per convertire le moli in microgrammi... quindi se devi arrivare alla concentrazione di 1 ug/ul in 10 ml partendo dalla soluzione x ug/ul che ti calcolerai... ti serve il volume y tale che
C1 V1 = C2 V2

più di questo è darti la soluzione del problema

in bocca al lupo

n.
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peyton
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21 Messaggi

Inserito il - 09 giugno 2014 : 15:38:59  Mostra Profilo Invia a peyton un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Per il primo punto ho utilizzato la legge di Lambert e Beer:
A=ecl dove A=3,4 :dato che mi serve il cammino ottico di 1 cm moltiplico l'assorbanza (mi è stato insegnato così) in questo caso di 5.
l=1 cm
e=43824

comunque non mi ritrovo con le unità di misura della concentrazione è in M o in mol. Mi spieghi??






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Neuroscience
Utente



659 Messaggi

Inserito il - 09 giugno 2014 : 18:39:19  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Neuroscience Invia a Neuroscience un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da peyton

Per il primo punto ho utilizzato la legge di Lambert e Beer:
A=ecl dove A=3,4 :dato che mi serve il cammino ottico di 1 cm moltiplico l'assorbanza (mi è stato insegnato così) in questo caso di 5.
l=1 cm
e=43824



Sinceramente mi sembra una procedura un po' arcaica dato che la variabile l è di fatto 0,2, se lo normalizzi ad 1cm è solo per paragonarlo ad altre assorbanze... ad ogni modo il risultato è lo stesso, fai solo un passaggio in più, a mio parere concettualmente inutile in questo contesto.

Citazione:
Messaggio inserito da peyton
comunque non mi ritrovo con le unità di misura della concentrazione è in M o in mol. Mi spieghi??


hai ragione intendevo M intesa come concentrazione.



n.
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peyton
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21 Messaggi

Inserito il - 10 giugno 2014 : 14:08:23  Mostra Profilo Invia a peyton un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ho fatto:

7,76*10^-5 M*66400=5,152 g/l=5152 ug/ul

V1C1=V2C2

V1=(10000 ul* 1 ug/ul)/5152 ug/ul=1,94 ul

giusto???

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Neuroscience
Utente



659 Messaggi

Inserito il - 11 giugno 2014 : 00:04:33  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Neuroscience Invia a Neuroscience un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da peyton

Ho fatto:

7,76*10^-5 M*66400=5,152 g/l=5152 ug/ul



L'ultima uguaglianza presenta qualche problema
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peyton
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21 Messaggi

Inserito il - 11 giugno 2014 : 09:26:36  Mostra Profilo Invia a peyton un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
può essere che 5,152 g/l = 5,152 ug/ul??

V1=(10000 ul* 1 ug/ul)/5,152 ug/ul=1940,9 ul
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Neuroscience
Utente



659 Messaggi

Inserito il - 11 giugno 2014 : 09:31:58  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Neuroscience Invia a Neuroscience un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
sì, è più sensato

n.
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peyton
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21 Messaggi

Inserito il - 11 giugno 2014 : 09:32:51  Mostra Profilo Invia a peyton un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
grazie mille !!!!!!!!!!!1
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