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 problema estrazione RNA da cellule con Trizol
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sam88
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10 Messaggi

Inserito il - 11 giugno 2014 : 16:28:59  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di sam88 Invia a sam88 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti! ho da un po' un problema che mi si ripresenta molto spesso e non riesco a capire il perchè: durante l'estrazione dell'RNA con il trizol molte volte capita che il pellet dell'RNA non si viene a formare e riesco ad ottenere pochissimo RNA (meno di un ug totale), nonostante parta da una piastrina da 35mm con le cellule a confluenza.
A qualcuno è già capitato???sapreste darmi un consiglio??
grazie a tutti!!!!!

Neuroscience
Utente



659 Messaggi

Inserito il - 12 giugno 2014 : 15:03:05  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Neuroscience Invia a Neuroscience un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Prova ad usare più trizol per l'estrazione,
cerca di rompere le cellule con siringa o potter.

Dipende dal ceppo cellulare, alcune hanno più RNA, altre meno a parità di confluenza e di piastra ovviamente

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sam88
Nuovo Arrivato



10 Messaggi

Inserito il - 12 giugno 2014 : 16:27:25  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di sam88 Invia a sam88 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
per una piastrina da 35mm il procollo del Trizol prevede di usare 1ml, può essere che le cellule erano troppe e non si sono lisate bene.
Proverò a seguire il tuo consiglio!
ti ringrazio molto per la tua risposta!

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