Trasfezione calcio fosfato

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chiara_g
Nuovo Arrivato

5 Messaggi

Inserito il - 01 marzo 2016 : 19:16:22

Buonasera a tutti!
Avrei una domanda per quanto riguarda la trasfezione,in particolare di cellule tumorali.Secondo il protocollo,i volumi delle soluzioni che vengono utilizzati in questa trasfezione (una soluzione in cui c'� il Dna plasmidico,acqua e calcio fosfato, e una in cui c'� HBS) sono calcolati per un volume finale di terreno di 2,5 ml (in una dish da 20cm2).Per una mia svista per� ho usato questi stessi volumi per un volume finale di terreno di 3 ml.Questo potrebbe compromettere la trasfezione in qualche modo,o 500 microlitri in pi� di terreno sono irrilevanti?Grazie mille per le risposte :)

Geeko
Utente

Citt�: Milano

1043 Messaggi

Inserito il - 02 marzo 2016 : 08:38:40

Se il protocollo di trasfezione � stato messo a punto come si deve per quelle cellule mi aspetto che sia pi� probabile che cambiando qualcosa l'efficienza di trasfezione cali. Soprattutto per le concentrazioni rispettivamente di DNA e calcio fosfato nella formazione dei precipitati. Magari invece � venuta pure meglio ahah devi controllare.
In ogni caso nella prima soluzione dovrebbe esserci calcio cloruro, non calcio fosfato.

chiara_g
Nuovo Arrivato

5 Messaggi

Inserito il - 02 marzo 2016 : 16:31:57

Si vero scusa,nella prima soluzione c'� calcio cloruro..comunque grazie della risposta,vedremo se � riuscita bene!