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Roberta Migliore
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 23 marzo 2018 : 19:14:36

Ciao a tutti! scrivo perch� ho un dubbio sul saggio MTT.
I procedimenti:
Piastramento e incubazione 24 ore
Trattamento 24/48 ore
al termine del trattamento aspirare delicatamente il terreno di coltura, aggiungere terreno fresco, aggiungere al terreno soluzione di MTT (5 mg/ml MTT in PBS)in concentrazione pari a quella del terreno di coltura(?)e incubare 3 ore a 37 gradi
Al termine dell incubazione aspirare il terreno, fare un lavaggio in PBS e aggiungere DMSO, poi leggere a 570 nm.
� corretto?
Altri dubbi: la polvere di MTT si pu� sciogliere direttamente in terreno? il terreno rosso interferisce con la lettura? in tal caso come � possibile risolvere? Vi ringrazio in anticipo per eventuali risposte

sofychan
Nuovo Arrivato

101 Messaggi

Inserito il - 28 marzo 2018 : 08:40:27

Non ho esperienza in MTT (noi facciamo sempre MTS), ma per l'ultima domanda direi che puoi usare tranquillamente medium without phenol red (e.g. DMEM). Noi per togliere eventuale interferenza facciamo cosi'.

Roberta Migliore
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 29 marzo 2018 : 12:29:27

Grazie mille per la risposta :)