problemi colture cellulari

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stefania mammoliti
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2 Messaggi

Inserito il - 06 dicembre 2021 : 17:36:47

non riesco a risolvere un problema sulle culture cellulari.
il problema sarebbe:
ho 20,40,25,15 cellule per quadrato grande della camera di burker, le ho diluite 1 a 2, quante cellule ho nella fiasca? mi torna 5x10^4
poi il problema continua cosi: devo piastrare per il test di vitalità in 100 pozzetti di 200microlitri di volume/pozzetto alla concentrazione di 10000 cellule/ml, come procedo?

sofychan
Nuovo Arrivato

101 Messaggi

Inserito il - 06 dicembre 2021 : 19:54:56

Non ti è stato dato un procollo?
In teoria la conta dovrebbe essere:

cell/ml= A+B+C+D/4 x2 x10^4, considerando 1:2 il tuo fattore di diluizione in tripan blue. Quindi risulterebbe un 500000 cells/mL nella flask. Ti risulta?

Per il secondo step: devi andare da una concentrazione di 500000 cells/mL nella flask a 10000 cell/mL nel pozzetto. Quindi devi diluire 1:50 la sospensione di cellule nella flask.
Il che vuol dire 1 mL di sospensione cellulare + 49 mL mezzo.
Oppure, visto che ti servono solo 20 mL di sospensione finale, 0.5+24.5 mL.
Oppure vai per diluizioni seriali.