determinazione concentrazione enzima

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riccardinho
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 09 giugno 2007 : 12:42:02

Scusate ragazzi, devo fare una tesina e mi serve sapere in modo chiaro e facile come posso determinare la concentrazione di un enzima attraverso i diversi strumenti (spettrofotometro,ecc..)
Il mio professore mi ha detto che c'e' anche un altro metodo, che prevede l'utilizzo del NADH ma non ci ho capito molto, potete aiutarmi per favore ? grazie

Gabriele
Utente

Prov.: Pisa
Citt�: Pisa

615 Messaggi

Inserito il - 09 giugno 2007 : 13:07:43

Si riferir� al test ottico immagino,accoppi la reazione catalizzata dal tuo enzima (nel caso in cui non sia adatta gi� la sua) con un'altra reazione in cui si ha produzione o consumo di NADH.La concentrazione del NADH/NAD+ pu� essere facilmente letta allo spettrofotometro.

"Chi rinuncia alla libert� per la sicurezza, non merita n� la libert� n� la sicurezza. E finir� col perdere entrambe."

riccardinho
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 09 giugno 2007 : 13:34:21

allora, guarda, lui mi ha detto che ci sono due metodi:

1) per valutare la concentrazione di enzima si pu� misurare l'assorbanza in funzione del tempo.

2) si pu� inoltre misurare la concentrazione del NAD sfruttando il metabolismo microbico della cellula. Siccome il NAD assorbe a lunghezze d'onda ben precise, si pu� risalire alla concentrazione dell'enzima.

Ma come faccio a risalire a tale concentrazione ? puoi farmi un esempio di reazioni accoppiate come hai gi� detto per favore ? grazie

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 10 giugno 2007 : 00:19:54

Questo forse ti potr� aiutare:
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=1378

Il NADH � solo un esempio, che va bene se l'enzima usa/produce NADH. Altrimenti dovrai usare qualcosa di altro.

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