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Mikjds
Nuovo Arrivato
Prov.: RA
Città: Faenza
2 Messaggi |
 Inserito il - 12 agosto 2008 : 14:58:33
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Ciao a tutti,
sono Michela e mi sono iscritta oggi a questo sito. Avrei bisogno di un aiutino...ho cercato di spulciare tra le vecchie discussioni ma non ho trovato la soluzione al mio problema. Sto mettendo a punto il Western Blot e per la rivelazione del segnale uso un kit di chemiluminescenza...il problema è che credo di non saper impostare correttare il Chemidoc perchè non riesco ad ottenere niente! Qualcuno mi sa può consigliare su come muovermi?
Grazie
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 12 agosto 2008 : 17:42:50
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Ciao Michela e benvenuta nel forum!!! 
Riguardo all'utilizzo Chemidoc, nessuno li lo sa usare? Comunque assieme allo strumento dovresti avere anche una guida. In ogni caso ti allego parte della guida del programma "Quantity One", l'appendice C che riguarda l'utilizzo del Chemidoc e una piccolissima guida di utilizzo che ho scritto io per il nostro laboratorio, che però riporta solo i passaggi principali.
Spero ti possano essere utili!
Se poi hai problemi più specifici scrivi!
Allegato:  Appendix C Chemidoc.pdf
247,41 KB
Allegato: SVILUPPO CON CHEMIDOC.pdf
119,27 KB |
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domi84
Moderatore
Città: Glasgow
1724 Messaggi |
Inserito il - 20 agosto 2008 : 00:30:57
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Waw!!! Noi abbiamo un chemidoc, ma nessuno la sa usare...
Proverò anch'io la tua guida rapida (al prossimo western)!!!!
Ma è vero che è meno sensibile della lastra? |
Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato... |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 20 agosto 2008 : 01:29:05
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Citazione:
Messaggio inserito da domi84
Waw!!! Noi abbiamo un chemidoc, ma nessuno la sa usare...
Ma com'è che ci sono tutti questi laboratori con il Chemidoc che nessuno sa usare??? Comunque la guida dovrebbe essere fornita con lo strumento!
Citazione:
Proverò anch'io la tua guida rapida (al prossimo western)!!!!
Ma è vero che è meno sensibile della lastra?
No non è vero! E' più sensibile in realtà! Però... bisogna saperlo usare!  Se non si settano i parametri correttamente in effetti si rischia di non vedere niente o di avere dei brutti risultati. Ti consiglio di fare le prime prove in doppio con le lastre!
Nel mio laboratorio alcuni ci hanno messo un po' a prenderci la mano, ma poi si sono convinti tutti che è meglio!
Ah dimenticavo... se fai le prove, non fare come quella "furbona" della mia collega che dopo aver messo la soluzione chemioluminescente sviluppava prima tutte le lastre e dopo 1 ora provava ad usare il Chemidoc (quando la luminescenza era ormai decaduta!) e poi diceva che era meno sensibile delle lastre!!!
Facci sapere come va la prova!
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domi84
Moderatore
Città: Glasgow
1724 Messaggi |
Inserito il - 20 agosto 2008 : 09:47:19
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Citazione:
Messaggio inserito da GFPina
Ah dimenticavo... se fai le prove, non fare come quella "furbona" della mia collega che dopo aver messo la soluzione chemioluminescente sviluppava prima tutte le lastre e dopo 1 ora provava ad usare il Chemidoc (quando la luminescenza era ormai decaduta!) e poi diceva che era meno sensibile delle lastre!!!
Ahahah... |
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Deimos
Nuovo Arrivato
Prov.: Pavia
Città: Pavia
2 Messaggi |
Inserito il - 27 agosto 2008 : 16:16:05
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Ciao a tutti, anch'io sono nuovo del forum.
Magari è una cosa banale ma un errore comune e quello di dimenticare, dopo aver posizionato la membrana con EpiWhite e iris semichiuso, di passare a Chemi 1x1 (o high sensitivity a seconda delle necessità) spegnere la luce ed aprire tutto l'iris. Questo è molto importante perchè la CCD è di fatto una macchina fotografica e se si lascia la luce accesa l'immagine risulta come sovraesposta mentre se non si apre tutto l'iris non viene captata luce a sufficienza.
Saluti |
Deimos the Western Magician |
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massimo cocchia
Nuovo Arrivato
1 Messaggi |
Inserito il - 11 settembre 2008 : 16:20:41
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Salve,
mi chiamo Massimo Cocchia, specialista Biorad per gli strumenti dell'analisi dell'immagine.
Approfitto per ribadire la mia, e naturalmente quella dei mie colleghi, assoluta disponibilità, a risolvere, insieme ai nostri clienti, tutti i problemi di natura applicativa che dovessero emergere.
Questo è un servizio che la nostra azienda assicura a tutti i clienti BioRad.
Potete contattare gli specialisti BioRad al numero 02-216091 oppure ussando l'email, che ha la forma: nome_cognome@bio-rad.com |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 11 settembre 2008 : 21:27:24
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Beh mi fa veramente piacere che anche uno "specialist" sia intervenuto sul forum! 
Comunque ribadisco anch'io quanto detto da Massimo, è vero contattate gli specialisti che sono davvero in gamba e disponibilissimi! Ho avuto personalmente a che fare con Massimo Cocchia sia prima che dopo l'acquisto dello strumento ed è stato un valido aiuto.  |
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domi84
Moderatore
Città: Glasgow
1724 Messaggi |
Inserito il - 04 ottobre 2008 : 15:43:31
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GFPina, ho provato a seguire la tua guida. Tanto per cominciare il nostro non è Chemidoc XRS, ma EQ...andrà bene lo stesso?
Ho provato a seguire tutti i passaggi...ma l'immagine resta nera...
Qualche consiglio?
(comunque martedì riprovo...e magari chiedo allo specialista...) |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 05 ottobre 2008 : 13:03:10
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Citazione:
Messaggio inserito da domi84
GFPina, ho provato a seguire la tua guida. Tanto per cominciare il nostro non è Chemidoc XRS, ma EQ...andrà bene lo stesso?
Se guardi il primo allegato che ho inserito è la guida per il Chemidoc EQ!
Comunque penso che cambi solo un po' la mascherina.
Citazione:
Ho provato a seguire tutti i passaggi...ma l'immagine resta nera...
Qualche consiglio?
 nera...
allora brevemente l'immagine che vede la telecamera è nera con le bande bianche (esattamente come per i gel di agarosio), poi il software la converte in fondo bianco e bande nere.
Quindi se non è venuto niente dovresti vedere tutto bianco, non tutto nero!
Sei sicuro di aver selezionato chemilunimescenza e aver messo il filtro giusto? (c'è una levettina in alto sul chemidoc).
Hai spento la luce "Epi white" durante l'acquisizione?
Scusa le domande stupide, ma sono le cose che spesso si dimenticano di fare.
Citazione:
e magari chiedo allo specialista...)
Beh se riesci sarebbe comunque la cosa migliore perchè può venire direttamente li e vedere anche se ci sono problemi con lo strumento!
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domi84
Moderatore
Città: Glasgow
1724 Messaggi |
Inserito il - 05 ottobre 2008 : 16:55:43
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Citazione:
Quindi se non è venuto niente dovresti vedere tutto bianco, non tutto nero!
Sei sicuro di aver selezionato chemilunimescenza e aver messo il filtro giusto? (c'è una levettina in alto sul chemidoc).
Hai spento la luce "Epi white" durante l'acquisizione?
Scusa le domande stupide, ma sono le cose che spesso si dimenticano di fare.
Ora do un'occhiata all'altro manuale. L'immagine è tutta nera, perchè avevo selezionato "invert display", altrimenti sarebbe stata tutta bianca. Il filtro credo fosse giusto. Però ricontrollo! La luce sicuro l'avevo spenta!!!!
Ti faccio sapere!!! |
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Sym
Nuovo Arrivato
1 Messaggi |
Inserito il - 09 ottobre 2008 : 15:29:25
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| Sì....mi associo a GFPina...Massimo Cocchia è stato anche per me fondamentale e necessario! Vi consiglio di contattarlo! Buon lavoro. |
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domi84
Moderatore
Città: Glasgow
1724 Messaggi |
Inserito il - 09 ottobre 2008 : 18:14:11
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Oggi ho riprovato!!! E' venuta!!!
E' normale che sulla lastra mi sono venuti degli aspecifici molto forti, mentre sull'immagine del chemiDOC non ce n'è traccia?!?!
Anch'io inoltre ho l'impressione che la sensibilità sia minore rispetto a quella della lastra...c'è qualcosa che posso modificare? |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 10 ottobre 2008 : 00:43:34
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Citazione:
Messaggio inserito da domi84
Oggi ho riprovato!!! E' venuta!!!
E' normale che sulla lastra mi sono venuti degli aspecifici molto forti, mentre sull'immagine del chemiDOC non ce n'è traccia?!?!
Anch'io inoltre ho l'impressione che la sensibilità sia minore rispetto a quella della lastra...c'è qualcosa che posso modificare?
 Beh dai un risultato c'è! Poi ti lamenti se hai meno aspecifici???
Non è facilissimo trovare le condizioni giuste all'inizio, bisogna prenderci la mano. Cambia se hai selezionato "Chemiluminescence" o "Chemi Hi Sensitivity" e poi dipende anche dai tempi di esposizione.
L'altra volta mi sono dimenticata di aggiungere che devi sempre controllare che l'iris sia aperto completamente.
Per il resto credo solo sia questione di farci un po' pratica!
Per quanto riguarda lo specialist rimane quanto detto, ma non credo sia sempre Massimo nel tuo caso... è un po' lontano!
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blottina
Nuovo Arrivato
1 Messaggi |
Inserito il - 05 marzo 2012 : 10:53:52
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| ragazzi scusate ho una domanda anche io!premettendo che sono riuscita ad usare il chemidoc grazie ai vostri protocolli,ora pero' mi chiedo come faccio l'analisi delle bande usando Quantity One? |
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unila
Nuovo Arrivato
1 Messaggi |
Inserito il - 24 luglio 2017 : 19:43:02
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| Ciao ragazzi!!! mi sono iscritta oggi al forum. Avrei dei dubbi con il ChemiDoc...ho letto la guida che è stata postata quindi ho le idee un po' più chiare...però come fate a prendere i riferimenti dei marker? Io ho acquisito un'immagine ma mi vede solo le bande che reagiscono con l'ECL. Grazie mille!!! |
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Discussione |
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Problemi con Chemidoc!!
Didattica
