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spongebob
Nuovo Arrivato
35 Messaggi |
 Inserito il - 03 settembre 2008 : 12:18:33
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ciao ragazzi sto preparando biocell II
mi togliete una curiosità? ma perchè per fare una co-immunoprecipitazione gli autori di un articolo si prendono la briga di fare una proteina di fusione con una tag-T7 per poi poter utilizzare anticorpi contro la tag???
non possono utilizzare gli Ab anti proteina endogena(JIP1)?
non è che non abbiano a disposizione gli Ab anti JIP, perchè per dimostrare che nel lisato c'è li usano!
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valia
Moderatore
Prov.: UK
1001 Messaggi |
Inserito il - 03 settembre 2008 : 13:40:32
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| Forse per purificare la proteina? Di solito si usano delle colonne che legano specificatamente le TAG, cosi' da purificare la proteina dal lisato. |
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spongebob
Nuovo Arrivato
35 Messaggi |
Inserito il - 03 settembre 2008 : 14:05:17
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ciao grazie!
si la tag serve per la purificazione o per fare l'immunoprecipitazione (IP), tramite utilizzo di Ab contro la tag....
ma mi chiedevo perchè perdere tempo per fare il costrutto, la trasfezione, la selezione dei cloni trasfettati, ecc ecc per poi lisarli e fare l'analisi di IP, quando secondo me basterebbe usare degli Ab anti-prot JIP...certamente avranno i loro motivi, altrimenti non si sbatterebbero troppo! |
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Dionysos
Moderatore
Città: Heidelberg
1913 Messaggi |
Inserito il - 03 settembre 2008 : 21:08:13
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Forse così ottengono una resa di purificazione più alta.
Magari l'anticorpo diretto non è altrettanto buono. |
Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)
Less Jim Morrison, more Sean Morrison!
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spongebob
Nuovo Arrivato
35 Messaggi |
Inserito il - 04 settembre 2008 : 09:55:54
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..... sono riuscita a parlare con una ragazza che ha già dato l'esame...ops, dice che gli Ab anti-JIP non esistono...
scusate, molte volte scarto in partenza le soluzioni più banali e ovvie!
grazie mille a chi mi ha risposto, a presto! |
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IP: perche con anticorpi anti-TAG?
Didattica
