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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm
Cittą: Paris, VIIčme arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 27 ottobre 2012 : 18:03:28  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti,
vorrei chiedervi se sapreste indirizzarmi verso un database online ove valutare la compatibilitą di condizioni tra due diversi enzimi di restrione? Es., se le due endonucleasi che intendo utilizzare abbiano un optimum di attivitą alla stessa temperatura oppure sia richiesto operare le due reazioni di restrizione in serie, anziché in parallelo?
Domanda bonus: oltre a Temperatura, quali altri parametri dovrei prendere in esame? Al momento riesco solo a pensare a concentrazione di sali.

Grazie delle dritte e buon sabato sera.

So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

SpemannOrganizer
Utente

Spemann

Cittą: Los Angeles


955 Messaggi

Inserito il - 27 ottobre 2012 : 20:22:47  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di SpemannOrganizer Invia a SpemannOrganizer un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
io ti suggerirei di andare a vedere sul website del tuo fornitore di enzimi di restrizione. Ad es., noi abbiamo NEB (new England Biolabs):
http://www.neb.com/nebecomm/products/category1.asp?#2
Che fornisce una comoda funzione:
http://www.neb.com/nebecomm/DoubleDigestCalculator.asp?#.UIwlpIY5CuM

Poi puoi anche ragionarci un po' da te, ad esempio se hai in lab la tabella dei tuoi enzimi, ti guardi le condizioni relative di ognuno e vedi con quale T e quale buffer hai l'optimum di reazione.
Infine, se prendi enzimi "HF" nn hai il problema di compatibilitą di buffer, perchč se nn erro funzionano tutti con lo stesso buffer (almeno x i NEB).

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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Cittą: Paris, VIIčme arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 29 ottobre 2012 : 18:24:44  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie Spemann, alla fine mi sono visitato la pagina dedicata della Roche, casa da cui acquistiamo i nostri ER, proprio come hai consigliato.
Se mai interessasse a qualcuno:
http://fr.scribd.com/doc/38214160/Sure-Cut-Buffers-Roche

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A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

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