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 chiarimenti sulla preparazione di una soluzione
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maryrose
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Inserito il - 20 marzo 2012 : 10:38:23  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di maryrose Invia a maryrose un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao ragazzi , volevo dei chiarimenti su una cosa: viene preparata una soluzione di un peptide 1 mM in tampone fosfato e in un solvente organico aggiungendo 100 microlitri peptide in solvente 100 micromolare a 900 microlitri di tampone sodio fosfato 20 mM.Cosa significa?? quanti microlitri di peptide sono stati usati? e di solvente

cami
Utente Junior

p

Città: roma


136 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2012 : 11:24:11  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di cami Invia a cami un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Mi sa che mi sono persa... Cioè si parte da una soluzione di peptide 100 uM (0,1 mM), se ne prendono 100 ul e si diluiscono in 900 ul di tampone sodio fosfato per arrivare ad una soluzione 1mM di peptide? Mi suona un po' strano....

“Research is what I'm doing when I don't know what I'm doing”
Werner von Braun
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maryrose
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29 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2012 : 11:29:41  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di maryrose Invia a maryrose un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Si prendono 100 ul di questo solvente 100 uM in cui è disciolto il peptide e a questo si aggiungono 900 ul di tampone..però non riesco a capire quanto peptide si prende
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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2012 : 12:52:16  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Cioè vorresti sapere quante umoli di peptide si prendono? Cosa vuoi calcolare?

So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

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maryrose
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29 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2012 : 15:47:05  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di maryrose Invia a maryrose un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
si, vorrei sapere quanti microlitri di peptide si sono presi
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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2012 : 15:51:27  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Le molecole non si misurano in microlitri.
Tu hai prelevato 100 microlitri di una soluzione che presenta una concentrazione del peptide pari a 100 micromolare. Al massimo puoi calcolare quante moli di peptide hai prelevato.

E' sufficiente conoscere la formula della molarità, che è...

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maryrose
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29 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2012 : 15:57:51  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di maryrose Invia a maryrose un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
moli su litro?
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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2012 : 16:10:55  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Si.
Ovviamente se tu conosci già il volume (100 microL) e la molarità (100 microM), dovrai ricavarti una formula inversa.

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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2012 : 16:36:26  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ho perso un pezzo del messaggio iniziale. A dir la verità non capisco se il peptide è disciolto nel tampone fosfato ed ha una concentrazione di 1 mM o cosa. E' oscura la parte del solvente 100 micromolare...
Ovviamente la diluizione che viene operata è 1:10, come scrivi tu camI.

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cami
Utente Junior

p

Città: roma


136 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2012 : 16:39:26  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di cami Invia a cami un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Scusate, ma 100uM non è la molarità del solvente in cui è solubilizzato il peptide? Anche perché se la soluzione peptide/solvente organico viene diluita 1:10 (100ul + 900ul di tampone fosfato), se la molarità del PEPTIDE fosse 100 microM (0,1 mM), alla fine non potresti avere una molarità del PEPTIDE di 1 mM... (parti da una soluzione più diluita, diluisci ulteriormente e ottieni una soluzione più concentrata...? nahhh)
Questo peptide di partenza è in polvere? O è già in soluzione?
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cami
Utente Junior

p

Città: roma


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Inserito il - 20 marzo 2012 : 16:40:36  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di cami Invia a cami un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ho fatto un casino con i messaggi, scusate, comunque credo di essere riuscita a postare quello che volevo dire...

“Research is what I'm doing when I don't know what I'm doing”
Werner von Braun
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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2012 : 16:43:19  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Pensa che io interpreto 1 mM come concentrazione iniziale...

La cosa migliore sarebbe che l'utente riformulasse il quesito in un italiano corretto o almeno intuibile...

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roberta.s
Utente Junior

yeast

Città: Parigi


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Inserito il - 20 marzo 2012 : 16:44:15  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di roberta.s Invia a roberta.s un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Scusate, ma non si capisce assolutamente nulla. Impossibile per me fare dei calcoli. Se prendi 100 uL di peptide 100 uM e li aggiungi a 900 uL di tampone, la concentrazione finale di peptide nel tampone (Vtot=1000uL) è 10 uM.
Qual é esattamente la ricetta della soluzione? Non credo sia umano scrivere una cosa del genere!
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cami
Utente Junior

p

Città: roma


136 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2012 : 16:50:35  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di cami Invia a cami un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da 0barra1

La cosa migliore sarebbe che l'utente riformulasse il quesito in un italiano corretto o almeno intuibile...


Povero utente, ha tutta la mia comprensione, pure io mi impicco sempre con le diluizioni....
Comunque nella sostanza concordo, non credo che possiamo essere di grande aiuto se non comprendiamo il quesito...

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maryrose
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29 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2012 : 20:31:04  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di maryrose Invia a maryrose un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
non c'è nessun quesito. Il professore ci ha detto in laboratorio di preparare una soluzione di peptide 1 mM in tampone fosfato e in HFIP e di prepararla aggiungendo 100 ul di peptide in HFIP 100 uM a 900 ul di tampone NaP.Queste sono state le sue parole, e io non le ho capite.
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Buddha
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37 Messaggi

Inserito il - 20 marzo 2012 : 22:05:50  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Buddha Invia a Buddha un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Scritto da MolecularLab Mobile

Il 100 uM si riferirà alla concentrazione di HFIP, il peptide avrà avuto concentrazione iniziale 10 mM
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cami
Utente Junior

p

Città: roma


136 Messaggi

Inserito il - 21 marzo 2012 : 09:51:36  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di cami Invia a cami un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Per "quesito" ci riferivamo al problema che avevi posto...
Quindi: si parte da una soluzione di peptide a concentrazione ignota, sciolto in HFIP 100uM, lo si diluisce 1:10 in tampone NaP 20mM per ottenere una soluzione contenente il peptide 1mM, giusto?
Allora la concentrazione iniziale di peptide in HFIP è giustamente 10mM (alla fine lo diluisci 1:10), e per sapere quanto peptide c'è in quei 100ul che prendi dovrai conoscerne il peso molecolare, a questo punto sai il volume (100ul) e puoi ricavarti la quantità (in g, ug, ng...) di peptide, con la solita formuletta M = (g/PM)/V...

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Werner von Braun
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maryrose
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29 Messaggi

Inserito il - 21 marzo 2012 : 10:55:28  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di maryrose Invia a maryrose un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie infinite, gentilissima. Ora mi è tutto più chiaro.
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maryrose
Nuovo Arrivato



29 Messaggi

Inserito il - 21 marzo 2012 : 18:28:06  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di maryrose Invia a maryrose un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
E se invece di 1mM la concentrazione finale fosse stata del 10 uM , quale sarebbe stata la concentrazione iniziale?
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cami
Utente Junior

p

Città: roma


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Inserito il - 21 marzo 2012 : 18:43:19  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di cami Invia a cami un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Se prendi sempre i tuoi 100ul di peptide in HFIP e li aggiungi a 900 ul di NaP, avrai sempre fatto una diluizione 1:10, quindi 10uM x 10 .... ?

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Werner von Braun
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Buddha
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37 Messaggi

Inserito il - 21 marzo 2012 : 18:59:08  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Buddha Invia a Buddha un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da maryrose

E se invece di 1mM la concentrazione finale fosse stata del 10 uM , quale sarebbe stata la concentrazione iniziale?



100 uM
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