Cleavage site enzima di restrizione

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moonycinzia
Utente Junior

234 Messaggi

Inserito il - 05 settembre 2019 : 15:59:23

Salve a tutti! Non scrivo da milleni ma mi auguro di trovare qui qualcuno molto piu�esperto di me in enzimi di restrizione.
Prima di rivolgermi alla letteratura ho pensato chissa�magari qualcuno ha una risposta in tempi rapidi!

Vorrei disegnare un substrato per un enzima di restrizione ma di questo enzima e�nota solo la sequenza di legame al DNA ma non quella di taglio (che potrebbe essere a monte o a valle e chissa�di quante basi).
Ho trovato questa sequenza di legame in un plasmide (singola) quindi pensavo di usare un qualche approccio combinato restrizione/PCR per identificare la sequenza di taglio ma non ho ancora le idee chiare. Qualcuno di voi ci si e�mai cimentato? Con quale approccio?

Grazie mille, sono aperta ad ogni idea.

moonycinzia
Utente Junior

234 Messaggi

Inserito il - 06 settembre 2019 : 16:45:41

Ho risolto credo,

faro�una doppia digestione seguita da blunt ending e da un topo cloning e sequenziamento. Se qualcuno ha delle idee piu�rapide e veloci...