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imy85x
Nuovo Arrivato
Città: napoli
110 Messaggi |
 Inserito il - 12 maggio 2008 : 19:32:27
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Salve ragazzi, in un articolo che devo tradurre per un seminario, ho trovato questo termine: pulse-chase, che a mio parere sembra un metodo per fare il labeling(che se non erro, dovrebbe essere una marcatura) dell'amilasi con 35S(radioisotopo zolfo 35).
non ho ben capito il significato di pulse-chase.
è una tecnica?in che consiste e perchè si usa?
se avete materiale a riguardo, è ben accetto!!
grazie in anticipo...
Baci Imy
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Imy
Le persone che meritano fiducia sono quelle che ti stanno accanto anche quando non le ami abbastanza.
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Patrizio
Moderatore
Città: Barcellona
1912 Messaggi |
Inserito il - 12 maggio 2008 : 23:16:13
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Non e' niente di che 
si puo' usare con i trascritti oppure sulle proteine,
niente la cellula viene messa in contatto con una molecola radioattiva ,dopo che l ha integrato viene lavata con tamponi e sali per eliminare il radioattivo che non e' entrato (in questo tuo caso l amilasi) e viene seguito a tempi diversi il suo percorso all interno della cellula per vedere il suo destino |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 12 maggio 2008 : 23:35:30
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Si è una tecnica, in italiano viene tradotta come “marcatura intermittente”.
In pratica serve per studiare la sintesi di proteine o acidi nucleici nella cellula utilizzando un precursore marcato radioattivamente: un aminoacido per le proteine o una base per gli acidi nucleici.
Le cellule vengono messe in presenza del precursore marcato (pulse) e successivamente in presenza dello stesso non marcato (chase).
I tempi di pulse e di chase possono essere variati.
Le applicazioni poi sono diverse, ad es. posso vedere quando una proteina viene sintetizzata durante il ciclo cellulare, posso seguire il suo destino e la sua localizzazione dopo la sintesi, è stato anche utilizzata per dimostrare la presenza dei frammenti di Okazaki.
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Spillo
Nuovo Arrivato
3 Messaggi |
Inserito il - 05 gennaio 2009 : 17:06:19
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| quando uso il pulse and chase per studiare la stabilità di un trascritto, come faccio poi a individuare solo il trascritto che mi interessa sul gel o come lo isolo dagli altri? |
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distillato
Nuovo Arrivato
13 Messaggi |
Inserito il - 28 ottobre 2013 : 08:54:59
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Citazione:
Messaggio inserito da GFPina
Le cellule vengono messe in presenza del precursore marcato (pulse) e successivamente in presenza dello stesso non marcato (chase).
I tempi di pulse e di chase possono essere variati.
non ho capito perchè poi si utilizza lo stesso precursore non marcato, cioè a che serve la fase chase |
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pulse-chase
Didattica
