|
hurricane86
Nuovo Arrivato
50 Messaggi |
 Inserito il - 30 luglio 2008 : 00:12:02
|
salve a tutti, dopo mesi di assenza (lo sò sono una sciagurata) sono tornata!!!
ultimamente mi stò scontrando con frustranti tentativi andati a vuoto di uno stupidissimo (a detta del prof) esperimento:
l'estrazione di DNA plasmidico da un lievito trasformato con una banca genomica avente un marcatore anche per coli (resistenza ampicillina)e la trasformazione con quest'ultimo di coli per amplificarlo, riestrarlo e sequenziarlo
bene:il batterio non ne vuole sapere di essere trasformato!!
ho provato sia con gli elettrocompetenti che con i chimici, sia preparati da noi in laboratorio sia commerciali, è stata rifatta più e più volte l'estrazione dal lievito...saranno più di 10 ormai i tentativi (eeeh allegria) cambiadto ogni volta una diversa variabile: la quantità di coltura di partenza, l'OD, le concentrazioni dei tamponi, al caldo, al freddo, il proticollo, la concentrazione di rispospensione finale, la quantità che fornisco ai batteri...nulla!!!
qualcuno sa darmi un'ipotesi per questa disfatta di caporetto?!
grazie a tutti!
|
Think I'll lose my mind if I don't find something to pacify
....muore lentamente chi non esplora cio che non conosce.... |
|
recupero plasmidi di lievito
Didattica e Relazioni
