Ciao a tutti, è il primo esame in cui li studio ed è quello di farmacologia. Ho cercato varie info su come si ottengono gli anticorpi monoclonali e ho un quadro cmq generale. ORa volevo chierdervi, ma i derivati degli anticorpi come si ottengono? mi riferisco ai frammenti Fab e scFV
Poi volevo chiedervi ma perchè la produzione di derivati degli anticorpi è più facile rispetto a quella dell' igG completa?
Nota che le risposte che ti dò sono da "didattica", non l'ho mai fatto nella pratica perchè non mi occupo direttamente di questo. Io lavoro sugli Ab da un punto di vista bioinformatico
I frammenti si ottengono per taglio proteolitico degli anticorpi interi, usando papaina o pepsina.
La produzione dei derivati può risultare più facile per alcuni motivi: in primis un singolo Fab è grande grosso modo un terzo di un anticorpo intero. In seconda battuta produrre un anticorpo intero funzionante richiederebbe ulteriori accorgimenti quali modifiche post-traduzionali specie-specifiche (es l'attacco di glicoconiugati). Terzo, quello che interessa nelle fasi iniziali è caratterizzare il sito di binding e la relativa affinità (aka come il paratopo interagisce con l'epitopo dell'antigene): in quest'ottica, perchè trascinarsi dietro ingombranti domini immunoglobulinici se interessa studiare solo le CDR o al massimo i domini variabili? (in realtà motivi ce ne sarebbero ma non credo siano menzionati nel tuo caso specifico, ad es. interazioni long-range dei domini costanti sulle regioni ipervariabili)