Ciao A tutti . In questi giorni sto usando questo macchinario, chiamato AKTA PRIME che serve per fare la cromatografia di affinità per le proteine. Sto cercando di ottenere frazioni da campioni di siero di un gruppo di pazienti. Mi chiedevo se qualcuno l'avesse mai usata e, se si, volevo qualche consiglio su come alterare la conducibilità delle proteine durante l'esperimento. In realtà poi ne ho parecchie di domande.
Aggiungo che i valori di conduttività erano all'incirca 13,95 per mS/cm per il PBS 1 x 1 M pH 7.4 (binding buffer) e dei valori di 3,0 mS/cm per l'elution buffer (glicina 1 M) pH 2.8. Fino a che i valori della glicina erano intorno a 5,0 la curva di eluizione (step elution e non gradient elution) era molto marcata ( infatti ottenevamo solo due frazioni/provette da un totale di 12. Quando i valori sono scesi intorno a 3,0 ( e anche inferiori) le curve sono venute diverse ( ottenendo più provette con materiale). Lo devo imputare al cambio di campione oppure ai valori troppo bassi della nuova glicina ?