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 Far aderire blastomeri di Xenopus laevis
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Ignis fatuus
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Inserito il - 26 giugno 2010 : 17:13:46  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Ignis fatuus Invia a Ignis fatuus un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve,

se separassi i due blastomeri di un embrione a stadio di due cellule di Xenopus laevis, come potrei farli aderire una seconda volta? Il semplice accostamento potrebbe bastare a promuovere la presa, anche in assenza di membrana vitellina? Come procedereste?

”Slumber, watcher, till the spheres
Six and twenty thousand years
Have revolv’d, and I return
To the spot where now I burn."

Polaris, H. P. Lovecraft.

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Inserito il - 28 giugno 2010 : 18:43:50  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di SpemannOrganizer Invia a SpemannOrganizer un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
nn saprei dirti... però sono interessato alla cosa, visto che lavoro con lo xenopus anche io... che esperimenti stai facendo, se nn sono indiscreto?
Ad ogni modo, come forse già saprai, è possibile far dissociare le cellule della calotta animale (animal cap) in una soluzione a bassa concentrazione di calcio (mi pare sia il calcio, in questo modo le caderine nn legano bene tra di loro, ma nn ricordo bene). Dopo averle dissociate comunque si possono fare riassociare. Però non so dirti se la stessa cosa (o qualcosa similare) si possa fare con i blastomeri di Xenopus a 2-cell stage...

In bocca al lupo!

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Ignis fatuus
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Inserito il - 28 giugno 2010 : 22:08:35  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Ignis fatuus Invia a Ignis fatuus un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
L'idea è quella di produrre chimere da utilizzare come modello animale per esperimenti successivi (non posso proprio essere più preciso, come potrai intuire la divulgazione di dati sperimentali lede interessi di terzi). Conosco la pratica del trapianto degli animal caps, ma sarei interessato all'ottenimento di chimere genomicamente divise lungo il piano sagittale mediano.

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Inserito il - 29 giugno 2010 : 00:17:45  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di SpemannOrganizer Invia a SpemannOrganizer un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
bello! sinceramente nn so se c'è qualcosa in letteratura, e nn so manco se sia possibile farlo... storicamente in Xenopus s'è sempre cercato di dividere i vari piani o assi corporei di sviluppo :)... ti auguro di riuscirci, in bocca al lupo!

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Ignis fatuus
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Inserito il - 01 luglio 2010 : 21:17:04  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Ignis fatuus Invia a Ignis fatuus un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Il problema con X. laevis è che gli embrioni sono piuttosto flaccidi a stadi precoci. I primi tentativi non hanno dato risultati incoraggianti, tuttavia riproverò e... chissà .
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Inserito il - 09 luglio 2010 : 14:45:02  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di SpemannOrganizer Invia a SpemannOrganizer un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
sì è vero sono un pò flaccidini... Tempo fa ho dovuto tagliare delle gastrule a metà, sulle quali poi fare delle ibridazioni... ricordo che lo facevamo in maniera un pò grossolana, e invece di tagliarli a volte mi si schiacciavano proprio. Però il prof mi disse che rimuovere la membrana di fecondazione poteva migliorare il risultato (non ricordo per quali motivi e cmq a stadi precoci è una bella impresa - se vuoi provare a rimuoverla "grattala" un pochino magari sul polo animale che è il polo che recupera + facilmente da "ferite").

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Ignis fatuus
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Inserito il - 11 luglio 2010 : 04:28:36  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Ignis fatuus Invia a Ignis fatuus un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie dei consigli. Ho provato ad effettuare la divisione dell'embrione sia senza che con membrana vitellina; non ho ancora avuto successo, però qualche risultato parziale lo si è intravisto (embrioni morti poco dopo il ricongiungimento dei blastomeri), e ciò fa ben sperare.

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SpemannOrganizer
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Spemann

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Inserito il - 11 luglio 2010 : 11:20:40  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di SpemannOrganizer Invia a SpemannOrganizer un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
bene. in bocca al lupo allora!! :)

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