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Marshepherd
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22 Messaggi |
 Inserito il - 25 aprile 2014 : 15:13:23
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Ciao a tutti, qualcuno potrebbe aiutarmi a capire meglio questi tre metodi di marcatura non radioattiva per acidi nucleici?
Ho trovato solo informazioni "base" ma vorrei capirci qualcosa in più:
1) sistema Biotina - Avidina/Streptavidina
si usano dNTP legati alla biotina che a sua volta si può legare alla Avidina o Spreptavidina (un legame per la prima e 4 per la seconda), ma non ho capito come si fa ad evidenziare la presenza di una sonda marcata con questa tecnica.
2) sistema UTP legato a digossigenina
si usa uridina trifosfato con legata la digossigenina in posizione 5 dell'anello pirimidinico e si usano anticorpi anti-digossigenina per legare questi residui; il metodo colorimetrico prevede l'utilizzo di fosfatasi alcalina che genera colore... ma come? perchè?
3) sistema rodanina-fluorescina
la prima emette nel rosso, la seconda nel verde.. ma in base a cosa? dove si legano?
Vi ringrazio per l'aiuto!
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