preamplificazione cDNA

Forum

Registrati Discussioni Recenti Preferiti Utenti Cerca Regolamento RSS Statistiche

Utilità

I libri
consigliati:

Strutture della vita. Teorie, batteri, protoctisti, funghi
Autori Vari

Genetica molecolare umana
Jack J. Pasternak

L'avventura della ricerca. Storia degli uomini che hanno inventato il mondo
Daniel J. Boorstin

Altri Libri

Nome Utente:	Password:
Riconoscimi automaticamente

Tutti i Forum

MolecularLab

Biologia Molecolare

preamplificazione cDNA

Nuova Discussione

Nuovo Sondaggio

Rispondi

Aggiungi ai Preferiti

Cerca nelle discussioni

Risorse di Biologia Molecolare:

Didattica

Blog Inside the Cell

Protocolli

Siti di Biologia Molecolare e Tecniche

Quiz

Ultime notizie

Aggiungi i tag

Quanto � utile/interessante questa discussione:

Autore

Discussione

matsche
Nuovo Arrivato

Prov.: PV/CA
Citt�: Pavia/Cagliari

23 Messaggi

Inserito il - 14 luglio 2012 : 20:28:14

Essendo il TaqMan PreAmp Master Mix Kit l'unico kit di preamplificazione di cDNA disponibile nel mio laboratorio al momento, ed avendo io a disposizione solo i primers "economici" da usare poi con SyBr Green per una qPCR (e quindi sprovvisti di sonda e quencher), mi chiedevo se qualcuno avesse mai eseguito una reazione di preamplificazione con master mix della TaqMan, con primers non-TaqMan.

Ora, visto che la chimica dei primers TaqMan, cio� tutta la storia del fluoroforo e quencher, servono solo per dare un segnale nella reazione di qPCR (ma sono inutili per la reazione di preamplificazione, che avviene in un thermal cycler e quindi non rivela fluorescenza), mi chiedo: perch� non dovrebbe riuscire?

La mia unica paura, conoscendo le politiche monopolistiche delle compagnie che vendono prodtti per ricerca, � che nel master mix della TaqMan ci sia qualcosa che faccia in modo che la reazione avvenga solo in presenza di primers TaqMan.

Qualcuno ha mai provato a fare ci� che sto per fare? avete suggerimenti?

grazie grazie molte grazie

"Sapere aude! Habe Mut, dich deines eigenen Verstandes zu bedienen!
Sapere aude! Abbi il coraggio di servirti della tua propria intelligenza!" Immanuel Kant
...Apr�s moi, le d�luge...