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Discussione |
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glo
Nuovo Arrivato
Prov.: Palermo
22 Messaggi |
 Inserito il - 05 gennaio 2006 : 12:26:07
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vorrei sapere se l'EtBr,durante la corsa elettroforetica,migra con il DNA dal polo- a quello +, o se fà il percorso inverso. inoltre,quanto EtBr si intercalerà tra le basi e quanto ne resterà nel gel? ed infine,ttt qst da cosa dipende? in parole povere ditemi ttt qll ke sapete sull'EtBr...siate in tanti: lunedì ho l'esame!!!
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Ornella |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 05 gennaio 2006 : 13:05:29
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Ah! L'EtBr questo sconosciuto!
Allora, l'etidio e' un intercalante e come tutti gli intercalanti ha una struttura aromatica molto simile a quella delle basi azotate e per questo riesce ad "insinuarsi" all'interno della doppia elica. (vedi struttura qui sotto)
L'etidio e' carico + quindi dovrebbe migrare verso il catodo, tranne quello che si e' intercalato e si muove con il DNA verso l'anodo.
Per quanto riguarda quanto se ne intercala... non ho proprio idea, ma basta poco, credimi (se metti < 0.1% di etidio nel gel va gia bene in molti casi). |
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DNAfingerprinting
Nuovo Arrivato
Prov.: Pordenone
Città: Fiume Veneto
23 Messaggi |
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biotech
Utente Junior
Prov.: Padova
Città: Padova
170 Messaggi |
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Luis 22
Utente
Città: Bari
755 Messaggi |
 Inserito il - 10 gennaio 2006 : 19:41:00
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Citazione:
Messaggio inserito da biotech
La domanda può sembrare stupida, ma cosa serve esattamente il bromuro d'etidio?
E' una sostanza fluorescente, intercalante del DNA, usata per il dosaggio fluorimetrico, poichè l'intensità di fluorescenza è proporzionale alla quantità di etidio che si intercala che, a sua volta, è proporzionale alle dimensioni degli acidi nucleici.
Non solo, può avere anche altre applicazioni, come ad esempio nell'estrazione di DNA plasmidico da cellule batteriche. |
 
La vita e i sogni sono fogli di uno stesso libro. Leggerli in ordine è vivere, sfogliarli a caso è sognare. (Arthur Schopenhauer)& |
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Barney1
Nuovo Arrivato
61 Messaggi |
Inserito il - 11 gennaio 2006 : 12:16:34
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Citazione:
Messaggio inserito da biotech
La domanda può sembrare stupida, ma cosa serve esattamente il bromuro d'etidio?
Bhè.. se non usi un intercalante come l'Etidio Bromuro quando fai una corsa elettroforetica.. dopo come fai a vedere le bande?! L'etidio bromuro è una sostanza che irradiata con raggi uv emette florescenza e intercalandosi nel DNA ne mostra la sua posizione nel gel.. |
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biotech
Utente Junior
Prov.: Padova
Città: Padova
170 Messaggi |
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canaparo
Nuovo Arrivato
3 Messaggi |
Inserito il - 02 aprile 2007 : 12:37:22
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| Il gel per la corsa elettroforetica per hla, può essere preparato nella cappa pre pcr Grazie |
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Saretta
Utente Junior
Prov.: Roma
Città: Provincia di Roma
263 Messaggi |
Inserito il - 12 ottobre 2008 : 10:29:07
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| Mi chiedevo, quanto è pericoloso questo Etidio? Ho letto la descrizione sulla sezione reagenti del sito ma mi chiedevo al livello di esperienza, mai venuti in contatto? |
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Gabriele
Utente
Prov.: Pisa
Città: Pisa
615 Messaggi |
Inserito il - 12 ottobre 2008 : 19:39:52
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Io me lo spruzzai su una manica del camice, per adesso non ho avuto sintomi.  |
"Chi rinuncia alla libertà per la sicurezza, non merita né la libertà né la sicurezza. E finirà col perdere entrambe." |
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morgan79
Utente Junior
Prov.: Bari
143 Messaggi |
Inserito il - 12 ottobre 2008 : 19:40:45
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quanto è pericoloso?? tanto... anzi tantissimo.
basti pensare che grazie alla sua capacità di intercalarsi tra le basi azotate del DNA sul gel di agarosio è anche in grado di intercalarsi nel DNA dell'operatore. E pensa un pò se si dovesse intercalare tra i geni che regolano il ciclo cellulare, provocando un cambio di espressione, cosa potrebbe succedere... |
il sapere non è sufficiente, bisogna applicare; il volere non è sufficiente, bisogna fare |
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Anyra
Utente Junior
Prov.: Pesaro-Urbino
Città: Saltara
212 Messaggi |
Inserito il - 13 ottobre 2008 : 10:14:51
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Citazione:
Messaggio inserito da canaparo
Il gel per la corsa elettroforetica per hla, può essere preparato nella cappa pre pcr Grazie
Solo se la cappa ha i filtri per al carbonio in uscita per le sostanze chimiche e i solventi, altrimenti NO!
RICORDATE PIU' SEMPLICE E PIU' VELOCE NON SONO MAI SICURI.
MEGLIO PERDERE 2 MINUTI PER ANDARE IN CAPPA CHIMICA CHE RESIRARE ETBR!!!!!!!! |
Il mio Cavaliere
http://s4.battleknight.it/index.php?loc=hire&ref=OTA3NTAw |
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biotool
Nuovo Arrivato
97 Messaggi |
Inserito il - 27 gennaio 2009 : 19:36:50
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ciao a tutti, mi sono da poco iscritto al forum!
Vorrei subito farvi una domanda seria al riguardo: nella scheda di sicurezza l'etidio bromuro è indicato come irritante se a contatto con l'epidermide, mentre tossico per inalazione. Quindi non mi è bene chiaro il pericolo se si è a contatto con questa sostanza, ad esempio con una goccia di etidio sull'epidermide del braccio. Vi è mai successo? Quali sono i rischi?
Grazie mille |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 27 gennaio 2009 : 20:12:34
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Una goccia di BrEt sulla pelle lavata subito una volta non ti porterà a nessun danno. Se lo fai tutti i giorni ovviamente il discorso cambia.
Oltre a quanto già detto (usarlo sotto cappa) aggiungerei di usare guanti in vinile e non in lattice quando si maneggia l'etidio e di non versarlo mai nell'agar bollente, lasciarlo sempre raffreddare prima per minimizzare la produzione di vapori. |
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biotool
Nuovo Arrivato
97 Messaggi |
Inserito il - 28 gennaio 2009 : 09:47:49
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Ti ringazio della pronta risposta, ero piuttosto preoccupato!
Il fatto è che molte cose non vengono dette, soprattutto sulla sicurezza e sulla pericolosità delle sostanze...
Visto che devo fare parecchi gel vorrei essere informato...si metto l'etidio in agar ormai tiepido, ma usando guanti semplici e non sotto cappa (non abbiamo cappe chimiche vicine) |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 28 gennaio 2009 : 11:03:44
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Citazione:
Messaggio inserito da chick80
... aggiungerei di usare guanti in vinile e non in lattice quando si maneggia l'etidio ...
No non in vinile! E' peggio del lattice, vanno usati guanti in nitrile.
Comunque sia se non si hanno i guanti in nitrile, il consiglio è di usare il doppio guanto ma in ogni caso non è che uno si rovescia sulle mani l'etidio (di solito!).
Allego un documento sulla sicurezza per l'uso dell'Etidio Bromuro:
Safe handling of ethidium bromide |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 28 gennaio 2009 : 11:39:20
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| Scusa, hai ragione... volevo dire nitrile. Veramente non sapevo neanche dell'esistenza dei guanti in vinile... |
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gio87
Utente Junior
126 Messaggi |
Inserito il - 18 giugno 2009 : 19:02:20
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Sono uno studente...oggi per sbaglio mi sono appoggiato con la mano sul bancone sporco di etidio bromuro...cosa potrebbe capitarmi? Sono un po preoccupato.. |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 18 giugno 2009 : 19:10:43
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Beh a parte il fatto che in laboratorio bisognerebbe sempre fare attenzione, non è che per una volta che vieni a contatto con dosi minime di Etidio (non ti sei rovesciato addosso il flacone, ma hai messo la mano sul bancone dove si usa l'etidio) ci siano danni così gravi.
Cito quanto ha detto chick80 sopra:
Citazione:
Messaggio inserito da chick80
Una goccia di BrEt sulla pelle lavata subito una volta non ti porterà a nessun danno. Se lo fai tutti i giorni ovviamente il discorso cambia.
fai solo ben attenzione la prossima volta!
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NicolasFlamel
Nuovo Arrivato
Città: Napoli
30 Messaggi |
Inserito il - 18 giugno 2009 : 20:23:29
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Citazione:
quanto EtBr si intercalerà tra le basi
Dipende dalla topologia del DNA: un DNA circolare superavvolto ne potrà assumere poco (in quanto bloccato nello svolgimento dell'elica - infatti l'etidio provoca un rilassamento dell'elica, svolgendola); se invece abbiamo un cccDNA con un nick possiamo già inserirne qualcosa in più, in un DNA lineare possiamo metterne più di quanto potevamo negl'esempi precedenti.
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viodice88
Nuovo Arrivato
Prov.: Napoli
Città: casandrino
41 Messaggi |
Inserito il - 25 agosto 2009 : 11:13:15
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salve a tutti..avrei una domanda da farvi in merito al bromuro di etidio. allora cito il Watson "quando lo ione etidio si intercala fra due coppie di basi, causa uno srotolamento dell'elica di 26° riducendo la normale rotazione delle coppie di basi da 36° a 10°" ora, quello che so io è che il bromuro di etidio causa un rilassamento dell'elica, ma se è vero, come credo che sia, quello che dice il libro, ad ogni giro dell'elica non ho più 10 paia di basi ma ben 36. questo non rende il DNA meno rilassato?
Attendo vostre risposte..pleaaaaaaaaase |
violetta iodice |
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babilei
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Didattica
