ENZIMI DI RESTRIZIONE

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ENZIMI DI RESTRIZIONE

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Discussione

ales
Utente Junior

Prov.: Palermo
Citt�: Palermo

455 Messaggi

Inserito il - 08 novembre 2006 : 12:16:29

Ciao a TUTTI!Mi servirebbe un aiuto per gli enzimi di restrizione:
Abbiamo due enzimi di restrizione
Bam HI Hind III che tagliano
8200 5250
500 3450
la doppi digestione BamHI/HindIII produce il seguente pattern elettroforetico:
Bam/Hind
5250
2950
500
VI PREGO AIUTATEMI A CAPIRNE IL MOTIVO...HO L'ESAME TRA POCO..:))

Ales

Anyra
Utente Junior

Prov.: Pesaro-Urbino
Citt�: Saltara

212 Messaggi

Inserito il - 08 novembre 2006 : 12:48:58

Il DNA da tagliare � lungo8700 bp (8200 + 500 -- 5250 + 3450)
Una taglio di Hind III � all�interno del frammento pi� lungo generato da BamHi

---------------------------- frammento intero
----------------------- ---- Taglio di Bam HI

---------------- ------------- Taglio di HIND III

---------------- -------- ---- digestione comune

Chiaro?

Buono studio

Il mio Cavaliere
http://s4.battleknight.it/index.php?loc=hire&ref=OTA3NTAw

ales
Utente Junior

Prov.: Palermo
Citt�: Palermo

455 Messaggi

Inserito il - 08 novembre 2006 : 14:02:02

Citazione:
Messaggio inserito da Anyra

Il DNA da tagliare � lungo8700 bp (8200 + 500 -- 5250 + 3450)
Una taglio di Hind III � all�interno del frammento pi� lungo generato da BamHi

---------------------------- frammento intero
----------------------- ---- Taglio di Bam HI

---------------- ------------- Taglio di HIND III

---------------- -------- ---- digestione comune

Chiaro?

Buono studio

Ti ringrazio tanto, ho capito alcune cose ma come mai i risultati della doppia digestione Bam/H�nd sono:
5250
2950
500
con quale ragionamento si arriva a questi risultati?Baci

Ales

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 08 novembre 2006 : 20:42:08

Allora, il ragionamento che devi fare � questo:

1) BamHI ti d� 2 frammenti, vuol dire che c'� un solo sito di taglio per questo enzima (vedi figura di sopra)

2) Anche Hind ti d� 2 frammenti, quindi anche x questo enzima c'� un solo sito di taglio

3) Nella doppia digestione hai 3 frammenti in quanto avrai 2 siti (Bam e Hind)

Il problema � sapere chi vien prima e chi vien dopo.

Hai essenzialmente 2 possibilit� (puoi anche mettere B dopo H, ma viene la stessa cosa).


            H
   5250     |    3450
--------------------------
500 |     8200
    B


            H
   3450     |    5250
--------------------------
500 |     8200
    B

Nel caso 1 la doppia digestione ti dar� un pezzo da 500, un pezzo da 5250-500=4750 e un pezzo da 3450
Nel caso 2 la doppia digestione ti dar� 500, 3450-500=2950 e 5250

Quindi il caso 2 � quello giusto.

Ha senso?

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ales
Utente Junior

Prov.: Palermo
Citt�: Palermo

455 Messaggi

Inserito il - 10 novembre 2006 : 13:51:05

Ti ringrazio tanto!Bacioni

Ales

ales
Utente Junior

Prov.: Palermo
Citt�: Palermo

455 Messaggi

Inserito il - 11 novembre 2006 : 15:00:38

Ciao!Ho provato a fare alcuni esercizi su questi enzimi e alcuni mi sono venuti ma come si fa a sapere le combinazioni giuste quando non si conosce il risultato? :) baci help!

Ales

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 11 novembre 2006 : 21:31:32

Cosa intendi con "non si sa il risultato"?
Prova a farci un esempio

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ales
Utente Junior

Prov.: Palermo
Citt�: Palermo

455 Messaggi

Inserito il - 12 novembre 2006 : 11:34:54

Ad esempio dall'esercizio precedente i due enzimi:
Bam Hind
8200 5250
500 3450
Io so che il risultato della loro doppia digestione �:
Bam/hind
5250
2950
500
se non lo sapessi come farei a trovare le combinazioni giuste come illustrato in precedenza?grazie bacioni

Ales

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 12 novembre 2006 : 20:42:07

Non hai modo.
La doppia digestione serve proprio a sapere chi vien prima e chi vien dopo!

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ales
Utente Junior

Prov.: Palermo
Citt�: Palermo

455 Messaggi

Inserito il - 12 novembre 2006 : 21:00:29

Quindi il risultato della doppia digestione lo si deve sapere sempre?

Ales

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 13 novembre 2006 : 00:28:09

S�, avendo solo la singola digestione non puoi sapere l'ordine.

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ales
Utente Junior

Prov.: Palermo
Citt�: Palermo

455 Messaggi

Inserito il - 15 novembre 2006 : 12:11:14

Mi potete consigliare un sito o libro dove studiare queste doppie digestioni enzimatiche che ancora non ho del tutto capito?Help!baci

Ales

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