| Autore |
Discussione |
|
|
AC
Nuovo Arrivato
45 Messaggi |
 Inserito il - 16 febbraio 2006 : 21:33:06
|
 Ciao a tutti!!!
avrei bisogno di una informazione: devo estrarre del DNA da vino, Avete un protocollo da darmi senza dover ricorrere all'uso di kit commerciali?
Grazie mille!!!
CIAO
|
|
|
|
|
chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
 Inserito il - 17 febbraio 2006 : 01:25:04
|
Da vino! Wow... ricerca interessante! 
Non l'ho mai fatto, prova a vedere questo articolo.
Usano un kit, ma puoi adattare la cosa.
Dovresti quindi aggiungere agenti denaturanti, agenti caotropici, detergenti (io andrei con SDS 0.1%) e proteinasi K. Lasci incubare 30' a 65 gradi, centrifughi il tutto e recuperi il surnatante.
A questo punto loro usano una colonnina, ma se vuoi evitare i kit puoi aggiungere ugual volume di isopropanolo, mischiare bene per inversione e poi centrifugare x 5' a temperatura ambiente, 13200 rpm.
Dovresti in questo modo avere un pellet di DNA (non è detto sia visibile ad occhio nudo).
Versi via il surnatante e lavi il pellet con etanolo 70%. Lasci evaporare all'aria per 10-20' e poi risospendi in un opportuno volume di TE (dipende un po' da quanto DNA hai ottenuto).
A questo punto lasci a 4 gradi o/n.
Il giorno dopo dai una vortexata veloce e sei pronto a fare PCR o quello che vuoi! |
Sei un nuovo arrivato?
Leggi il regolamento del forum e presentati qui
My photo portfolio (now on G+!) |
 |
|
|
AC
Nuovo Arrivato
45 Messaggi |
 Inserito il - 17 febbraio 2006 : 11:50:42
|
Grazie mille!!! Ci proverò
devo farti i miei complimenti... Tu hai una risposta per tutti!!
 Grazie ancora!!! |
|
|
|
chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
|
|
AC
Nuovo Arrivato
45 Messaggi |
Inserito il - 20 febbraio 2006 : 16:23:14
|
 Ciao Chick
ho provato ma non funziona
provo a modificare qualcosa, grazie lo stesso |
|
|
| |
Discussione |
|
estrazione DNA
Didattica
