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elisabetta strafella
Nuovo Arrivato
18 Messaggi |
 Inserito il - 13 marzo 2009 : 16:47:50
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Salve a tutti dovrei fare un esperimento sul ciclo cellulare qualcuno sa suggerirmi come si può impostare?
Andrebbe bene piastrare 50000 cell in una 24 well?(50.000 cellule in 1ml per ogni well??)
Grazie
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 13 marzo 2009 : 17:58:37
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Guarda, non ho mai fatto una cosa del genere quindi non posso risponderti, però credo che nessuno ti possa dare una risposta esauriente se non ci dai un po' più di informazioni.
Ad es. che cellule sono? Batteriche, lieviti, cellule eucariote, cellule tumorali... capisci che c'è molta differenza!
Inoltre, che tipo di metodica devi usare su queste cellule? Quanto tempo le vuoi lasciare nella piastra? |
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la_fra
Utente
750 Messaggi |
Inserito il - 14 marzo 2009 : 09:19:26
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infatti, dipende dal tempo di replicazione delle tue cellule, dal fatto che siano in adesione o in sospensione, dai tempi per cui devi andare a monitorare il ciclo ecc..per esempio io lavorando su cellule tumorali per testare gli effetti di un farmaco fino a 96 ore ne piastravo 10-15000 in 24 well-plate, con numeri maggiori il pozzetto del non trattato sennò scoppiava! quindi dacci qualche info in +  |
Doctors are men who prescribe medicines of which they know little, to cure diseases of which they know less, in human beings of whom they know nothing (Voltaire) |
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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
Inserito il - 14 marzo 2009 : 14:31:43
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ricordati anche un'altra cosa, oltre a tenere conto del tipo di cellule che stai usando, devi anche considerare che le cellule quando si replicano cambiano morfologia in alcune fasi del ciclo. diventano molto rotondeggianti e tendono molto facilmente a staccarsi dal fondo della piastra. una buona soluzione è quella di fare un coating prima della piastratura, ad esempio con fibronectina (pensa che le mie cellule, nonostante il coating, si staccano anche quando sollevo la piastra dall'incubatore! )
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...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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elisabetta strafella
Nuovo Arrivato
18 Messaggi |
Inserito il - 15 marzo 2009 : 22:49:26
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Avete ragione.
Uso le Met5A cellule mesoteliali aderenti. Devo testare delle sostanze tossiche e capire a che punto del ciclo cellulare queste sostanze agiscono bloccandolo. |
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ciclo cellulare
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