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Autore Discussione  

terreno85
Utente Junior




235 Messaggi
Inserito il - 15 marzo 2009 : 14:22:42  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di terreno85 Invia a terreno85 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao ragazzi ! Per estrarre un gene da un fungo ( in particolare il gene cssB , importante per la sintesi delle ciclosporine ) cosa devo fare ?
Una teoria può esserre provata da un esperimento. Ma nessun percorso guida dall'esperimento alla nascita di una teoria

Simona84
Utente Junior


Città: milano


131 Messaggi
Inserito il - 15 marzo 2009 : 17:56:40  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Simona84 Invia a Simona84 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
estrarre un gene?penso che te intenda estrarre il DNA e amplificare il gene, devi disegnarti i primers, la sequenza la puoi trovare su NCBI e siti simili e poi fare la PCR.
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GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8408 Messaggi
Inserito il - 15 marzo 2009 : 18:34:37  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Si infatti potresti spiegarti meglio?
E sopratutto la sequenza di questo gene nel fungo in questione è nota???
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terreno85
Utente Junior




235 Messaggi
Inserito il - 17 marzo 2009 : 16:01:35  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di terreno85 Invia a terreno85 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
si mi sono espresso male .... il fatto è qst stò lavorando ad un progetto : " espressione e purificazioe della alanina racemasi ricombinate di tolypocladium in E.Coli " .. In sintesi ho letto delle tesi di ragazzi che lo hanno fatto prima di me ... Ma tutti partono descrivedo i terreni di cultura , i tipi di ceppi E.Coli utilizzati , le tecninche di purificazione ecc ecc

Il fatto strano è che parlano di vettori di clonaggio , al quale è stato inserito il gene CssB sotto il controllo di un promotore induzibile Lac .
Vi chiedo : è possibile che in laboratorio gia avevano qst plsmidi pronti all'uso ?? .... oppure perche nn hanno parlato di far crescera anche Tolypocladium estrarre il DNA dello stesso e come ha detto simona disegnare i primers e fare PCR ? e infine formare i vettori di clonaggio
Una teoria può esserre provata da un esperimento. Ma nessun percorso guida dall'esperimento alla nascita di una teoria
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terreno85
Utente Junior




235 Messaggi
Inserito il - 17 marzo 2009 : 16:17:12  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di terreno85 Invia a terreno85 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ahahah scusate !!! ho risolto da solo l'enigma :

I cDNA dei geni codificanti l’alanina racemasi in C. carbonum (toxG) e T.
niveum (cssB) sono stati gentilmente forniti rispettivamente dal Dott.
Una teoria può esserre provata da un esperimento. Ma nessun percorso guida dall'esperimento alla nascita di una teoria
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