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Autore

Discussione

Robytea
Nuovo Arrivato

Prov.: Bari
Citt�: Monopoli

37 Messaggi

Inserito il - 30 marzo 2009 : 16:12:11

Se devo fare PCR con primer che formano con il mio template dei mismatch puntiformi, devo abbassare la Temperatura di annealing?
se si,perch�?

grazie in anticipo
PS spero sia chiara la mia domanda...nn sapevo come impostarla...

Patrizio
Moderatore

Citt�: Barcellona

1912 Messaggi

Inserito il - 30 marzo 2009 : 16:55:25

perche' in questo modo "costringi" l'appaiamento dei primers che in presenza di quella mutazione/i sara' termodinamicamente sfavorito qualora non siano totalmente complementari,infatti quando si devono usare questi tipi di primers e' preferibile che il mismatch cada al centro e non verso il 3' nonche' maggiore e' la lunghezza del primer e piu' facilmente si appaiera'

Robytea
Nuovo Arrivato

Prov.: Bari
Citt�: Monopoli

37 Messaggi

Inserito il - 30 marzo 2009 : 16:58:38

grazie mille...ora � tutto pi� chiaro!