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violettablu
Nuovo Arrivato

6 Messaggi

Inserito il - 20 aprile 2009 : 18:05:50

Ciao ragazzi,
secondo voi posso preparare da me marker per gel nativo?
Se preparo un mix di proteine a peso molecolare noto, funzionano come markers?

domi84
Moderatore

Citt�: Glasgow

1724 Messaggi

Inserito il - 20 aprile 2009 : 18:34:31

B�...penso proprio di s�. I marker sono proteine a peso noto....
Ovviamente devi settare le quantit� di proteine da mettere per fare i marker...altrimenti trovi delle bande enormi...

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...

coccinellas
Utente Junior

Citt�: l'isola che non c'�

138 Messaggi

Inserito il - 20 aprile 2009 : 19:38:48

...........e come faccio a sapere qual'� la quantit� di proteine da usare ?
Poi mi viene un'altro dubbio: nel gel nativo le proteine non corrono solo in base al peso molecolare, ma anche in base alla carica, questo pu� falsare la determinazione del peso molecolare?

violettablu
Nuovo Arrivato

6 Messaggi

Inserito il - 20 aprile 2009 : 19:59:31

Si infatti ,come faccio a sapere quanta proteina devo usare?
E poi secondo voli quale proteine mi conviene usare visto che l'enzima di mio interesse ha PM di 36 KDa come monomero e 72KDa come dimero.
GRAZIE

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 20 aprile 2009 : 20:00:42

Scusa, ma che vantaggio avresti? Dovresti comunque comprare le proteine ad un alto grado di purezza, non credo risparmieresti molto no?

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violettablu
Nuovo Arrivato

6 Messaggi

Inserito il - 20 aprile 2009 : 20:10:43

..............non � una questione di risparmio ecomonico, � una questione di tempo.......... e poi potrei utilizzare proteine che gi� ho in lab!

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 20 aprile 2009 : 20:12:57

Scusa, ma il risparmio di tempo ce l'hai usando il marker bello e fatto no?

Ad ogni modo, se vuoi provare questa � la composizione del marker "NativeMark" della Invitrogen. Non dicono le quantit� per�.


        protein           |  MW
--------------------------+-------
IgM Hexamer               | 1236
IgM Pentamer              | 1048
Apoferritin band 1        |  720
Apoferritin band 2        |  480
B-phycoerythrin           |  242
Lactate Dehydrogenase     |  146
Bovine Serum Albumin      |   66
Soybean Trypsin Inhibitor |   20

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