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Simona84
Utente Junior

Citt�: milano

131 Messaggi

Inserito il - 29 aprile 2009 : 09:49:05

ciao a tutti!!
qualcuno potrebbe fornirmi un protocollo per la quantificazione proteica col metodo Bradford usando il Nanodrp, perch� io ho solo il protocollo per la tradizionale quantificazione allo spettrofotometro.
Poi quanlcuno di voi utilizza il Nanodrop?Le letture sono molto differenti da un tradizionale spettrofotometro?Sicuramente saranno pi� precise ma volevo sapere se qualcuno di voi ha un p� di esperienza con questo strumento e se ha notato una notevole differenza nelle misurazioni!
ciao e grazie!!!

Gabriele
Utente

Prov.: Pisa
Citt�: Pisa

615 Messaggi

Inserito il - 29 aprile 2009 : 11:54:55

Io l'ho usato con il DNA, oltre a essere infinitamente pi� veloce ho potuto constatare dei valori di concentrazione pi� bassi rispetto alle letture dello spettrofotometro mediamente del 30%, c'� da dire per� che le letture di quello spettrofotometro erano tutto meno che affidabili e che il kit di estrazione che usavo in quel periodo � stato poi abbandonato per problemi nella successiva pcr.

"Chi rinuncia alla libert� per la sicurezza, non merita n� la libert� n� la sicurezza. E finir� col perdere entrambe."

l�
Utente Junior

565 Messaggi

Inserito il - 29 aprile 2009 : 20:32:04

ciao! io l'ho usato qualche volta, ma mai con il brathford. Metti il microlitro ( o 2, non nmi ricordo) e il programma ti fa la quantificazione.
Per quanto riguarda l'affidabilit� (nella mia esperienza) ho avuto letture pi� affidabili con il Nanodrop rispetto allo spettrofotometro.

Simona84
Utente Junior

Citt�: milano

131 Messaggi

Inserito il - 30 aprile 2009 : 10:36:53

si anch'io lo uso per la quantificazione degli acidi nucleici ma lo strumento ti d� anche la possiblit� di quantificare gli estratti proteici. io per� dispongo seplicemnete del protocollo del bradford tradizionale in cuvetta (2ml totali) con lo spettrofotometro.
la ditta che produce lo strumento mi ha detto che serve un protocollo diverso (volevo sapere i volumi e le proporzioni tra campione (e standard) e coomassie. hanno detto che va bene anche quello per le letture in micropiastra...

prossima biologa
Utente Attivo

1437 Messaggi

Inserito il - 15 dicembre 2009 : 22:36:53

non l'ho mai usato con il bradford ma lo uso spesso con il dna... � molto veloce e pratico e in laboratorio dicono tutti che hanno riscontrato molti vantaggi infatti benche ci sia lo spettrofotometro usano in nanodrop quindi... penso sia migliore...

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