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moonycinzia
Utente Junior

234 Messaggi

Inserito il - 25 maggio 2009 : 21:22:32

Ciao a tutti!
Avrei bisogno delle vostre menti sempre utili per ideare un esperimento...a dire il vero sono sicura che se impegnassi a fare med line troverei risposte alle mie domande ma il mio tempo riguardo allo studio di articoli ora � incentrato sulla stesura di un lavoro..insomma gn� faccio!

Dunque esiste un modo per andare ad analizzare in vivo la formazione nel nucleo di un complesso covalente enzima-DNA?
Ho trovto un kit che riguarda la lisi cellulare e poi il caricamnto su un gradiente di cloruro di cesio. Andrebbe bene ma ho scoperto ahime che le cellule vanno trattate a 37 gradi e i listati caricati sul gradiente senza congelare gli estratti nucleari o manipolarli per evitare la perdita dei complessi covalenti stessi.
Le cellule non le tratto io ma un altro laboratorio, in un'altra citt�
La domanda esatta dunque � questa, come faccio a valutare la formazione di un complesso covalente enzima-DNA da estratti nucleari congelati?
(premetto che le cellule andrebbero trattate e non con un composto che aumenterebbe la stabilizzazione del suddetto complesso)
grazie mille a chiunque fornir� idee

darkene
Utente Junior

291 Messaggi

Inserito il - 26 maggio 2009 : 22:30:19

io non l'ho mai fatto, ma so che per verificare il legame tra una proteina e il DNA (ad esempio un fattore trascrizionale) si fa una tecnica che si chiama ChIP (Chromatin Immuno-Precipitation). cerca in rete notizie a riguardo

Dionysos
Moderatore

Citt�: Heidelberg

1913 Messaggi

Inserito il - 04 giugno 2009 : 01:06:31

boh, FRET con oligo sequenza-specifici fluoromarcati?
Sempre che il tuo enzima riconosca sequenze specifiche

Volere libera : questa � la vera dottrina della volont� e della libert�
(F.W. Nietzsche)

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