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Autore

Discussione

planetx
Nuovo Arrivato

Prov.: Taranto
Città: Talsano

25 Messaggi

Inserito il - 28 maggio 2009 : 22:16:37

Salve Ragazzi.
Ho un problema: devo presentare un progetto di ingegneria genetica, ed ho bisogno di inventarmi una pianticella GM. Ora, per fare questa, mi trovo nella situazione di usare vettori binari, ed ho bisogno di fare co-trasformazione con due ceppi di Agrobacterium, in quanto in questa pianta devo infilare 3 geni. Avevo pensato di usare un ceppo contenente il costrutto 1, che ha un solo transgene, e un altro ceppo con il costrutto 2 contenente 2 trasngeni. Il problema è: da chi compro un plasmide per fare il secondo costrutto? Ho visto che ci sono diverse tecniche, come quelle che usano la Cre/lox, oppure i plasmidi pRCS/pAUX in cui il pRCS usa endonucleasi rare e ci posso infilare pezzettini staccati dai pAUX, che invece hanno i polylinker del pUC19 (se non erro). Ma ripeto il problema fondamentale: chi me lo vende? E dove posso trovare una mappa di questi plasmidi, dato che le ricerche su GenBank non danno risultati (se digito pRCS, pAUX etc) ma mi danno solo articoli?

Grazie :)

GFPina
Moderatore

Città: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 29 maggio 2009 : 00:09:25

Guarda ho provato a cercare un po', ma sinceramente non so se qualcuno li vende. Sono plasmidi modificati a partire da altri plasmidi a loro volta modificati...
trovi solo negli articoli qualcosa!
Qua: Delivery of Multiple Transgenes to Plant Cells
vengono spiegate varie tecnologie per fare quello che dici tu tra cui i vettori pRCS e pAUX.
pRCS sono: pPZP-RCS1 e pPZP-RCS2
Qua: A set of modular plant transformation vectors allowing flexible insertion of up to six expression units (non è free!)
viene spiegato come sono stati fatti i vettori pPZP-RCS e pAUX.

Spero ti siano d'aiuto.