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 clonaggi: cornice di lettura
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topolab
Nuovo Arrivato

Prov.: Wu
Cittā: Wuerzburg


3 Messaggi

Inserito il - 16 giugno 2009 : 10:34:21  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di topolab Invia a topolab un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Domanda semplicissima: quando , nel clonare un inserto in un vettore di espressione, č necessario prestare attenzione alla cornice di lettura?

In sintesi vorrei clonare evitando la pcr semplicemente tagliando fuori il mio frammento da un costrutto giā clonato. i siti di restrizione sarebbero gli stessi ma mi č venuto il dubbio della cornice di lettura. Il nuovo vettore, per l'espressione in baculovirus, nn č provvisto di tag quindi non ci sarebbe nessuna fusione da effettuare...ma ha un sito di resistenza all'ampicillina per crescita in batteri... help!!!!


TopoLab!

GFPina
Moderatore

GFPina

Cittā: Milano


8380 Messaggi

Inserito il - 19 giugno 2009 : 20:32:26  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao topolab,
benvenuta su MolecularLab!

Se non hai proteine di fusione non ci sono problemi, l'importante č che il tuo frammento abbia l'ATG di inizio e il codone di stop.

Il sito di resistenza all'ampicillina č a parte e viene espresso per conto suo, non c'entra con tuo gene.

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topolab
Nuovo Arrivato

Prov.: Wu
Cittā: Wuerzburg


3 Messaggi

Inserito il - 25 giugno 2009 : 09:39:06  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di topolab Invia a topolab un Messaggio Privato  Rispondi Quotando

Ok, scusate se ho risenserito la discussione allora perfetto posso continuare con il clonaggio in questa maniera! grazie per la risposta!

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