clonaggi: cornice di lettura

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Autore

Discussione

topolab
Nuovo Arrivato

Prov.: Wu
Citt�: Wuerzburg

3 Messaggi

Inserito il - 16 giugno 2009 : 10:34:21

Domanda semplicissima: quando , nel clonare un inserto in un vettore di espressione, � necessario prestare attenzione alla cornice di lettura?

In sintesi vorrei clonare evitando la pcr semplicemente tagliando fuori il mio frammento da un costrutto gi� clonato. i siti di restrizione sarebbero gli stessi ma mi � venuto il dubbio della cornice di lettura. Il nuovo vettore, per l'espressione in baculovirus, nn � provvisto di tag quindi non ci sarebbe nessuna fusione da effettuare...ma ha un sito di resistenza all'ampicillina per crescita in batteri... help!!!!

TopoLab!

GFPina
Moderatore

Citt�: Milano

8408 Messaggi

Inserito il - 19 giugno 2009 : 20:32:26

Ciao topolab,
benvenuta su MolecularLab!

Se non hai proteine di fusione non ci sono problemi, l'importante � che il tuo frammento abbia l'ATG di inizio e il codone di stop.

Il sito di resistenza all'ampicillina � a parte e viene espresso per conto suo, non c'entra con tuo gene.

topolab
Nuovo Arrivato

Prov.: Wu
Citt�: Wuerzburg

3 Messaggi

Inserito il - 25 giugno 2009 : 09:39:06

Ok, scusate se ho risenserito la discussione

allora perfetto posso continuare con il clonaggio in questa maniera! grazie per la risposta!