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matricola
Nuovo Arrivato
4 Messaggi |
 Inserito il - 18 giugno 2009 : 15:41:18
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ciao raga, mi hanno lasciata sola in lab... devo diluire un siRNA appena arrivato, che e' 10nmol concentrato. poi mi servono 240nM totali per il mio experimento come si fa???
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 18 giugno 2009 : 15:47:43
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aspetta...
Citazione:
e' 10nmol concentrato
intendi che sono 10 nanomoli in polvere o che è concentrato 10nM (nano molare)?
Citazione:
poi mi servono 240nM totali per il mio experimento
nel tuo esperimento servono 240nmoli totali o ti serve ad una concentrazione di 240nM (nano molare)? |
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matricola
Nuovo Arrivato
4 Messaggi |
Inserito il - 18 giugno 2009 : 16:05:13
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| che sono 10nmoli in polvere |
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matricola
Nuovo Arrivato
4 Messaggi |
Inserito il - 18 giugno 2009 : 16:06:24
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| e mi serve una concentrazione 240nM(nanomolare) |
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 18 giugno 2009 : 17:05:30
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Mi sono dimenticata di farti una domanda, cioè in quanto volume finale devi utilizzare il siRNA?
Comunque a te serve una concentrazione finale 240nM quindi:
240 nmoli/L = 240 pmoli/ml = 0,24 pmoli/ul
quindi per ogni microlitro della suluzione finale in cui metti il siRNA dovrai mettere 0,24 picomoli.
Tu hai 10nmol se le sciogli in 1 ml avrai: 10nmol/ml = 10pmol/ul
10 picomoli/ul poi qua dipende tutto dal volume di reazione finale, se devi mettere il tuo siRNA in 100ul finali allora puoi prendere:
(0,24 pmol/ul)/(10pmol/ul) x 100ul = 2,4ul che è un volume piccolo ma comunque pipettabile.
Se hai un volume finale inferiore dovresti perderne un volume troppo piccolo!
Quindi ti consiglierei da questa soluzione madre di fare una diluizione 1:10 così avrai 1 pmol/ul
a questo punto dovrai prenderne: 0,24/1 = 0,24 ul
attenzione però sono 0,24 ul per ogni ul di soluzione finale!
Quindi se la soluzione finale in cui usi il siRNA è ad es. 100ul dovrai prenderne: 0,24 ul x 100ul = 24ul
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matricola
Nuovo Arrivato
4 Messaggi |
Inserito il - 18 giugno 2009 : 17:54:31
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| grazie GFPina!!!!! sei stata chiarissima :) |
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si
