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tambua
Nuovo Arrivato
50 Messaggi |
 Inserito il - 16 settembre 2009 : 13:22:33
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Un dubbio atroce:
Ma il DNA circolare (batterico, plasmidico) sottoposto a denaturazione si separa come un DNA lineare in 2 filamenti o rimane ancorato in un punto? (Modello anelli delle olimpiadi per intenderci)
Perchè altrimenti non ho capito bene st'immagine?
Dopo aver amplificato con la pfu ottengo 2 plasmidi separati, ognuno con un elica parentale ed una di neosintesi o una struttura comprendente ben 4 eliche?(Ammesso che non sia altamente instabile).
Grazie
Immagine:
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Neuroscience
Utente
659 Messaggi |
Inserito il - 16 settembre 2009 : 14:06:03
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Non so se ho capito cosa vuoi sapere, però l'immagine dice che da ogni filamento di DNA parentale si sintetizzano due nuovi vettori circolari a doppio filamento di cui uno è parentale e l'altro è neosintetizzato.
Ovviamente quello di neosintesi non è perfettamente chiuso e quindi può abbandonare il DNA parentale senza fare i cerchi delle olimpiadi.
Non si formano strutture di DNA a 4 filamenti e la figura è solo rappresentativa, in realtà i due filamenti di DNA parentali sono nettamente divisi lontani, ed ognuno di questi darà luogo alla neosintesi dell'altro filamento mancante.
Alla fine dei x cicli ottieni una predominanza di DNA sintetizzato dalla Pfu, magari nikkato, ed una piccola porzione di DNA plasmidico mixato tra la neositesi da pfu ed il DNA parentale.
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GFPina
Moderatore
Città: Milano
8408 Messaggi |
Inserito il - 16 settembre 2009 : 14:18:55
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Premesso quello che ha detto Neuroscience, tieni comunque presente che c'è differenza tra il DNA plasmidico sottoposto a PCR e la replicazione del DNA genomico dei batteri. (visto che hai nominato anche quello!)
Durante la replicazione del DNA genomico questo non viene denaturato completamente (estattamente come per gli eucarioti) e si forma una bolla di replicazione, questo dà origine alla tipica forma a "teta"
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tambua
Nuovo Arrivato
50 Messaggi |
Inserito il - 16 settembre 2009 : 15:40:27
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Grazie mille ragazzi sapevo di poter contare su di voi.
Per completezza vi lascio questo link, così magari potete darci un'occhiata. La storia del Quickgen kit adesso mi è chiara, per quanto riguarda l'idea della denaturazione del dna a doppia elica circolare, tutti i dubbi mi sono nati da questa lettura trovata casualmente.
link http://www.notahelix.com/not_a_helix_files/index-tn.htm
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DNA circolare
Didattica
