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 clonaggio problematico...
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Mandy
Nuovo Arrivato




3 Messaggi

Inserito il - 17 settembre 2009 : 11:34:23  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Mandy Invia a Mandy un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti, sono nuova da queste parti ma vi leggo spesso, spero possiate aiutarmi...dunque...sto usando il kit di clonaggio p-Gem che finora non mi ha mai dato problemi. Questa settimana da clonaggio già collaudato altre volte non ho ottenuto NESSUNA COLONIA!!! pensando ad un errore di distrazione/sperimentale ho ripetuto tutto da capo usando sia controllo positivo che background control...ma non è cresciuto nulla nemmeno in queste piastre!!! non so che pensare
Un grazie a chi mi darà un aiuto...o almeno un conforto!

germy
Nuovo Arrivato

444



74 Messaggi

Inserito il - 25 settembre 2009 : 22:29:30  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di germy Invia a germy un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
i kit hanno le scadenze in alcuni casi...
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Neuroscience
Utente



659 Messaggi

Inserito il - 25 settembre 2009 : 23:06:26  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Neuroscience Invia a Neuroscience un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
è il pGEM-T ?
Hai usato la Taq o pfu per la pcr? rapporto vettore:frammento giusto?
funziona la ligasi?

Se ci dai qualche dettaglio in più ti potremmo essere maggiormente di aiuto

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Mandy
Nuovo Arrivato




3 Messaggi

Inserito il - 28 settembre 2009 : 10:21:55  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Mandy Invia a Mandy un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
non ho più scritto sul forum perchè le colonie sono comparse dopo 48h! non mi so spiegare il perchè (forse una leggera perdita di competenza delle cellule?) ma il clonaggio è andato a buon fine.
Grazie per i vostri suggerimenti!
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