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Iside
Utente Attivo
Città: Napoli
1375 Messaggi |
 Inserito il - 23 settembre 2009 : 19:18:34
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sto andando in crisi, mi sembr auna cosa elementare eppure mi sto confondendo.
allora, il fatto è che sto lavorando al mio primo sottoclonaggio  e sono quasi giunta alla fine. ho inserito il mio inserto nel vettore, ho ligato, ho trasformato, le colonie sono cresciute, le ho piccate e poi ci ho fatto la mini prep. fin quì ci siamo. oggi ho digerito un po' mini prep e l'ho corsa: al mio occhio inesperto sembrava che non ci fosse alcuna banda che corrispondesse all'inserto e che gli enzimi non avessero tagliato. ho chiesto soccorso e una ragazza con parecchia esperienza più di me, guardando il gel, mi ha detto che l'inserto c'era, era poco ma c'era.
e poi mi dice:"se avesse funzionato un solo enzima, avresti visto 3 bande"!!!
CRISIIIIIIII!!! ma perchè 3 bande? se avesse tagliato un solo enzima avrei avuto un plasmide linearizzato, quindi solo una banda...o sbaglio?
W le proteine!!!
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...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...
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Neuroscience
Utente
659 Messaggi |
Inserito il - 23 settembre 2009 : 19:40:11
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bhé forse dovresti chiarire con quella dottoressa cosa volesse dire...
magari avrà detto "se NON avesse funzionato l'enzima, avresti visto 3 bande"!!! riferendosi al non digerito che generalmente compare con tre bande strane.
Tu avevi una sola banda, quindi lei avrà dedotto che il tuo enzima ha funzionato...
è una vaga ipotesi, bisognerebbe vedere il gel per capire, certo che quando hai più esperienza cominci a vedere anche bande che il geldoc non vede.
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