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annapasto
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 16 novembre 2009 : 23:57:29

ciao ragazzi, mi trovo per la prima volta alle prese con l'immunofluorescenza su cellule che crescono in sospensione e che devo fare aderire al vetrino (ovviamente senza fare il citospin) per poi marcarle direttamente sul vetrino stesso, con un Ab intranucleare.

Qualcuno di voi potrebbe darmi delle dritte?
Avete mai usato l' NP40 come permeabilizzante?me lo hanno consigliato per la membrana nucleare ma non sono sicura sia molto meglio del classico triton.

Grazie infinite
Anna

la_fra
Utente

750 Messaggi

Inserito il - 17 novembre 2009 : 00:39:06

ciao anna

perch� non puoi/vuoi fare un cytospin x marcarle? Se crescono in sospensione non saprei come fare a farle aderire su vetrino. Io per permeabilizzare ho sempre usato il Triton, le uniche differenze viste finora in termine di specificit� o resa della marcatura le ho viste in base al fissativo usato (es para piuttosto che etanolo)

Doctors are men who prescribe medicines of which they know little, to cure diseases of which they know less, in human beings of whom they know nothing (Voltaire)

annapasto
Nuovo Arrivato

3 Messaggi

Inserito il - 17 novembre 2009 : 18:28:39

perch� mi si modifica la morfologia e il mio prof non vuole...