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catia
Nuovo Arrivato
Prov.: Ancona
Città: ancona
2 Messaggi |
Inserito il - 09 giugno 2006 : 15:17:52
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ciao a tutti, qualcuno mi può aiutare! sto lavorando con mitocondri funzionali estratti da cuore di ratto, per valutare la produzione di ATP. il mio problema è che in queste ultime 2 settimane i mitocondri sembrano nn produrre più ATP, cioè sembrano nn funzionare, pur mantenendo la stessa metodica e soluzioni. qualcuno di voi lavora con i mitocondri e mi può dare un consiglio? o mi può indicare qualche sito? grazie,
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
Inserito il - 10 giugno 2006 : 01:54:21
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Io ricontrollerei le soluzioni, magari qualche buffer e' un po' vecchio ed e' andato fuori pH, oppure e' stato lasciato alla temperatura sbagliata (es. a T ambiente quando invece doveva stare a 4 gradi). |
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catia
Nuovo Arrivato
Prov.: Ancona
Città: ancona
2 Messaggi |
Inserito il - 12 giugno 2006 : 10:01:36
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per quanto riguarda i buffer sono tutti nuovi, li ho già ripreparati freschi per escludere il problema che hai detto. il fatto è che lavoro da pochissimo sui mitocondri, il mio problema è che nel bianco vedo una presenza di ATP basale, nei campioni con i mitocondri dovrei vedere una quantità di ATP molto maggiore, invece l'ATP valutato è di molto inferiore al Bianco, com se i mitocondri lo consumano anzichè produrlo... mahhh |
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chick80
Moderatore
Città: Edinburgh
11491 Messaggi |
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Patrizio
Moderatore
Città: Barcellona
1912 Messaggi |
Inserito il - 16 giugno 2006 : 21:47:08
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secondo me e' normale che dopo un po non funzionano piu',indipendementente dal buffer,anche le proteine dei complessi hanno un loro turnover e dopo un po' vengono degradate,non credi?io non lavoro sui mitocondri ma sono affascinato da questi organuli e spero di lavorarci |
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valentina85
Nuovo Arrivato
5 Messaggi |
Inserito il - 03 luglio 2006 : 18:16:00
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non mai lavorato coi mitocondri ma potresti valutare la tenperatura e la presenza di ossigeno per il normale funzionamento della fosforilazione!!! |
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