Forum

Nome Utente:
Password:
Riconoscimi automaticamente
 Tutti i Forum
 Laboratorio
 Tecniche
 cromatografia
 Nuova Discussione  Nuovo Sondaggio Nuovo Sondaggio
 Rispondi Aggiungi ai Preferiti Aggiungi ai Preferiti
Cerca nelle discussioni
I seguenti utenti stanno leggendo questo Forum Qui c'è:

Aggiungi Tag Aggiungi i tag

Quanto è utile/interessante questa discussione:

Autore Discussione  

fabio
Nuovo Arrivato



29 Messaggi

Inserito il - 15 giugno 2006 : 12:48:29  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di fabio Invia a fabio un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao, dovrei purificare una proteina ricombinante con coda di istidina mediante cromatografia per affinità con nickel.
Il problema è che non posso utilizzare l'imidazolo per l'eluizione. Qualcuno può per cortesia indicarmi un alternativa all'imidazolo.
grazie.

chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 15 giugno 2006 : 13:57:13  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Perche' non puoi usare l'imidazolo? Ho guardato un po' in giro ma un po' tutti usano imidazolo come eluente x la cromatografia con nickel.

Sei un nuovo arrivato?
Leggi il regolamento del forum e presentati qui

My photo portfolio (now on G+!)
Torna all'inizio della Pagina

fabio
Nuovo Arrivato



29 Messaggi

Inserito il - 19 giugno 2006 : 10:36:39  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di fabio Invia a fabio un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
non posso usare l'imidazolo perche la proteina ricombinante che devo purificare è un inibitore spefifico di alcune proteasi. Ho scoperto che una proteasi, la catepsina B, (che testo per saggiare l'attività inibitoria della proteina purificata) è inibita anche dall'imidazolo presente nel mio campione. Ho provato con Gel filtrazione, Dialisi, ma nulla da fare forse basta una sola molecola di imidazolo ad inibire la cathepsina.

ciao
Torna all'inizio della Pagina

Miss Adenina
Nuovo Arrivato

Miss Adenina

Prov.: Napoli


45 Messaggi

Inserito il - 19 giugno 2006 : 16:08:47  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Miss Adenina Invia a Miss Adenina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
forse sbaglio... ma azzardo a dare un suggerimento
non puoi usare la crom a scambio ionico?
Torna all'inizio della Pagina

fabio
Nuovo Arrivato



29 Messaggi

Inserito il - 19 giugno 2006 : 16:35:20  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di fabio Invia a fabio un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
si ho provato ma ottengo una pessima resa dal momento che per la natura delle mie proteine ricombinanti l'espressione indotta in bl21de3 (E. Coli) e molto bassa e poi mi porto dietro schifezze.
La cromatografia per affinità mi permette un alta resa ma il problema è che devo usare l'imidazolo.
Torna all'inizio della Pagina
  Discussione  

Quanto è utile/interessante questa discussione:

 Nuova Discussione  Nuovo Sondaggio Nuovo Sondaggio
 Rispondi Aggiungi ai Preferiti Aggiungi ai Preferiti
Cerca nelle discussioni
Vai a:
MolecularLab.it © 2003-18 MolecularLab.it Torna all'inizio della Pagina