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kristanko
Utente Junior

Città: Bologna


123 Messaggi

Inserito il - 22 febbraio 2010 : 10:59:34  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di kristanko Invia a kristanko un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ragazzi/e, ho bisogno di PARERI...
ho un farmaco che copre il sito di ATTIVAZIONE (tyr216) di GSK3 beta...
con Western Blotting dovrei vedere quindi una minore attività della suddetta proteina.
Ma non ho l'Ab per Gsk3beta-P (tyr) .. ho solo l'Ab per Gsk3beta-P (ser9) .. perchè è universalmente riscontrato che la DISATTIVAZIONE della proteina avviene per fosforilazione della Serina 9.

Secondo voi ho un modo di fare detection senza comprare l'Ab per Gsk fosforilato in Tirosina?
C'è una "scappatoia" meno costosa???

Vi prego rispondete.
ciao!

cami
Utente Junior

p

Città: roma


136 Messaggi

Inserito il - 24 febbraio 2010 : 17:13:54  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di cami Invia a cami un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
la prima cosa che mi viene in mente è che potresti fare una coimmunoprecipitazione: immunoprecipiti con un anticorpo per fosfotirosina e blotti con GSK3B (però in questo caso l'ideale sarebbe usare un anticorpo che riconosca un sito non specifico di GSK, ovvero non utilizzerei p-GSK3Bser9, ma un anti-GSK3B totale)
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