ragazzi/e, ho bisogno di PARERI... ho un farmaco che copre il sito di ATTIVAZIONE (tyr216) di GSK3 beta... con Western Blotting dovrei vedere quindi una minore attività della suddetta proteina. Ma non ho l'Ab per Gsk3beta-P (tyr) .. ho solo l'Ab per Gsk3beta-P (ser9) .. perchè è universalmente riscontrato che la DISATTIVAZIONE della proteina avviene per fosforilazione della Serina 9.
Secondo voi ho un modo di fare detection senza comprare l'Ab per Gsk fosforilato in Tirosina? C'è una "scappatoia" meno costosa???
la prima cosa che mi viene in mente è che potresti fare una coimmunoprecipitazione: immunoprecipiti con un anticorpo per fosfotirosina e blotti con GSK3B (però in questo caso l'ideale sarebbe usare un anticorpo che riconosca un sito non specifico di GSK, ovvero non utilizzerei p-GSK3Bser9, ma un anti-GSK3B totale)