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moonycinzia
Utente Junior



234 Messaggi

Inserito il - 14 marzo 2010 : 14:09:54  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di moonycinzia Invia a moonycinzia un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti.
Da giorni sto cercando di capire come poter fare un'inserzione o una delezione di 228 pb nelmio gene ricombinante inserito nel mio vettore di espressione.
Ho trovato che con il kit di cui giÓ dispongo in lab(quick change) Ŕ possibile, in soli due passaggi, fare delle lunghe delezioni o inserzioni.
Il concetto Ŕ quello di , attraverso un primo step, sintetizzare dei megaprimers, da utilizzare nel secondo step per fare la delezione o inserzione.
Sulla carta tutto molto semplice e elegante.
La mia domanda Ŕ se qualcuno di voi ha mai provato a farlo e se conosce un protocollo dettagliato di come procedere.
In alternativa, qualcuno di vioi si Ŕ mai cimentato in delezioni o inserzioni di ampie parti senza fare un clonaggio?
Grazie mille!
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